[发明专利]中国西门塔尔牛FGF-1基因作胴体肉品质的遗传标记

权利要求书

1.用于中国西门塔尔牛胴体和肉品质性状遗传标记的FGF-1基因，其特征在于：

FGF-1基因的核苷酸序列如：序列表Seq ID NO.3、Seq ID NO.6和Seq ID NO.9所示。

2.一种用FGF-1基因检测中国西门塔尔牛胴体组成和肉质性状的分子标记方法，其特征在于：

从中国西门塔尔牛血液中提取基因组DNA，设计扩增如权利要求1 所述的中国西门塔尔牛FGF-1基因SNPs的引物对：

P1正向引物F：5' TCCCTGGTTCAGAGTTCAAG 3'，

       P1反向引物R：5' GGGTGTGGGTGCTGTTATC 3'；

       P2正向引物F：5' GTTCGTAGAGAGCCACAGATG 3'，

P2反向引物R：5' ATCACTGTGCCAAAGGAAAT 3'；

    P3正向引物F：5' GTAGACGGCACACACCTCAG 3'，

    P3反向引物R：5' GATAATGGTTTTGCGACAGC 3'；

用所示的特异性引物在中国西门塔尔牛基因组中进行PCR扩增，PCR产物纯化、克隆测序，获得如序列表Seq ID NO.3、Seq ID NO.6和Seq ID NO.9所示的核苷酸序列，其中分别包括FGF-1基因8528 A>T、72251 A>C和13970 A>T的单核苷酸碱基突变，并且利用PCR-RFLP方法对中国西门塔尔牛群体中FGF-1基因3个SNPs进行了检测。

3.如权利要求2所述中国西门塔尔牛胴体组成和肉质性状相关的FGF-1基因SNPs的检测方法，其特征在于：

所述的PCR扩增条件是：25 μL反应体系，包括DNA 模板（50 ng/μL）1 μL、上下游引物（10 μmol/L）各1 μL、dNTPs（2 mmol/L）2.5 μL、Taq DNA 聚合酶（5 U/μL）0.3 μL、Mg²⁺（25 mmol/L）1.5 μL、10×PCR 缓冲液2.5 μL、超纯水15.2 μL； 所述的PCR 扩增反应程序为：95℃变性5 min，95℃变性30 s，55℃（P1）、59℃（P2）、59.5℃（P3）退火30 s，72℃延伸30 s（P3为60s），进行30个循环，最后72℃延伸10 min。

4.如权利要求2所述中国西门塔尔牛胴体组成和肉质性状相关的FGF-1基因SNPs的检测方法，其特征在于：

SNP1（I2-8528 A>T）为Xsp-Ⅰ内切酶，在功能区域识别序列为C/TAG；SNP2（I2-72251 A>C）为Hae-                                               内切酶，在功能区域识别序列为GG/CC；SNP3（I2-13970 A>T）为Rsa-内切酶，在功能区域识别序列为GT/AC。