[发明专利]一种CD40胞外区的表达纯化及其用途

说明书

本发明涉及一种CD40胞外区的表达纯化及其用途。首次通过优化实现了利用酵母细胞重组表达CD40蛋白氨基端胞外区。并且首次论证了CD40蛋白氨基端胞外区对肿瘤细胞有明显的抑制作用，可以作为一种抗肿瘤药物。

技术领域

本发明涉及基因工程领域，更具体地，本发明涉及一种CD40胞外区的表达纯化及其用途。

背景技术

CD40-CD40L信号通路是免疫系统激活的辅助信号之一，抗原递呈细胞激活T细胞免疫不仅需要TCR MHC抗原肽信号，还需要、CD28-B7等共刺激信号，CD40-CD40L信号增加B7.1、B7.2分子表达。CD40不仅在B细胞、DC细胞、巨噬细胞等抗原递呈细胞中表达，还广泛表达于内皮细胞、肥大细胞，成纤维细胞，肿瘤细胞，平滑肌细胞表面。这也提示着CD40具有广泛的功能，除了前续提到的抗原递呈作用，它还参与辅助性T细胞启动和细胞毒性T细胞功能，在B细胞发育和抗体类型转换时也发挥重要作用等等。

CD40-CD40L信号通路在1型糖尿病、多发性硬化症、炎症性肠炎(IBD)、牛皮癣、关节炎和系统性红斑狼疮等自身免疫病中是过度激活的，阻断该信号通路已经在相应小鼠模型中(NOD小鼠、EAE小鼠、IBD小鼠、CIA、SLE小鼠)被证明可以减轻病理作用。

目前阻断该信号通路的主要策略是应用针对CD40L的抗体，其中包括Ruplizumab(BG9588)和Toralizumab(IDEC-131)，它们早在21世纪初就进入临床研究，Ruplizumab在二期临床治疗SLE和肾脏移植中显现出疗效。但是它们都因为并发血管栓塞而没能实现应用。治疗思路相应转移到针对CD40的单抗研究上，ch5D12正在进行克罗恩病(Crohn’sdisease)一期和二期临床试验，另一个CD40单抗HCD122也在进行治疗MM和CLL的一期临床研究。

综上，鉴于CD40-CD40L信号通路与多种疾病存在相关性，本领域迫切需要进一步针对CD40-CD40L信号通路加以研究，开发以该信号通路为突破口的新型治疗手段或治疗药物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种CD40胞外区的表达纯化及其用途。

在本发明的第一方面，提供CD40蛋白氨基端胞外区的用途，用于制备抑制肿瘤或抑制炎症的药物组合物。

在一个优选例中，所述的CD40蛋白氨基端胞外区是CD40蛋白第21-193位氨基酸序列的蛋白。

在另一优选例中，所述的肿瘤是淋巴瘤。

在另一优选例中，所述的炎症是肠炎。

在另一优选例中，所述的淋巴瘤是弥漫型大B细胞淋巴瘤。

在另一优选例中，所述的CD40蛋白氨基端胞外区是不包含CD40蛋白第20位脯氨酸的蛋白。

在另一优选例中，所述的药物组合物还用于：阻断CD40-CD40L信号通路；阻断CD40介导的非经典NF-κB信号通路的激活；和/或降低细胞内原癌基因cMYC的表达。

在本发明的另一方面，提供一种CD40蛋白氨基端胞外区，其是CD40蛋白第21-193位氨基酸序列的蛋白；较佳地，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

在本发明的另一方面，提供一种多核苷酸，其编码所述的CD40蛋白氨基端胞外区；较佳地，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2中第16-537位所示。

在本发明的另一方面，提供一种用于抑制肿瘤或抑制炎症的药物组合物，其含有所述的CD40蛋白氨基端胞外区。

在本发明的另一方面，提供一种重组表达载体，其中包含有所述的多核苷酸。

在本发明的另一方面，提供一种重组酵母细胞，其中包含有所述的多核苷酸或含有所述多核苷酸的重组表达载体。