[发明专利]从米糠中提取谷氨酸脱羧酶的方法和生产γ-氨基丁酸的方法在审
| 申请号： | 201410682557.8 | 申请日： | 2014-11-24 |
| 公开（公告）号： | CN104388414A | 公开（公告）日： | 2015-03-04 |
| 发明（设计）人： | 金京勋 | 申请（专利权）人： | 苏州嘉禧萝生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12P13/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 215011 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 米糠 提取 谷氨酸 脱羧酶 方法 生产 氨基 丁酸 | ||
1.从米糠中提取谷氨酸脱羧酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取米糠500g，破碎仪破碎成粉末状；
(2)米糠：pH5.5-6.0的磷酸缓冲液的重量比为1:2-1:3，4℃过夜浸提；
(3)4000rpm/min离心，得到谷氨酸脱羧酶粗提液；
(4)40-60％硫酸铵沉淀粗提液，静置4h以上，4000-6000rpm/min离心，弃上清，得到谷氨酸脱羧酶沉淀固体；50-100mL、pH 5.5-6.0的磷酸缓冲液溶解沉淀，得到谷氨酸脱羧酶液。
2.根据权利要求1所述的从米糠中提取谷氨酸脱羧酶的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液pH为5.5，还包含1-5mmol巯基乙醇，1-3mmol EDTA-2Na，5％-10％甘油。
3.根据权利要求1所述的从米糠中提取谷氨酸脱羧酶的方法，其特征在于，所述硫酸铵沉淀的浓度为40-50％。
4.根据权利要求3所述的从米糠中提取谷氨酸脱羧酶的方法，其特征在于，所述硫酸铵沉淀的浓度为45％。
5.一种生产γ-氨基丁酸的方法，利用权利要求1-4任一项方法提取的谷氨酸脱羧酶，其特征在于，5-20mg/mL谷氨酸为底物，加入0.1g/L的维生素B6，反应pH5.5，37℃反应30-60min，得到GABA产品；酶反应中谷氨酸脱羧酶液、谷氨酸底物、维生素B6的体积比为1:200:100。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，谷氨酸底物浓度为10mg/mL，反应时间为60min。
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