[发明专利]一种新的黄曲霉及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种新的黄曲霉及其用途。

背景技术

黄曲霉(Aspergillusflavus)，半知菌类，一种常见腐生真菌。多见于发 霉的粮食、粮制品及其它霉腐的有机物上。菌落生长较快，结构疏松，表面 灰绿色，背面无色或略呈褐色。菌体有许多复杂的分枝菌丝构成。营养菌丝 具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗，顶端产生烧瓶形 或近球形顶囊，表面产生许多小梗(一般为双层)，小梗上着生成串的表面粗 糙的球形分生孢子。分生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢子合成孢子头，可用 于产生淀粉酶、蛋白酶和磷酸二酯酶等，也是酿造工业中的常见菌种。

目前，未见黄曲霉及其代谢产物具有抑制细菌的活性的报道。

发明内容

本发明提供了一种新的黄曲霉，其抑菌代谢产物的制备方法及其用于制 备抗细菌药物或消毒剂的用途。

本发明黄曲霉，其特征在于：它是由中国微生物菌种保藏管理委员会普 通微生物中心保藏的保藏号为CGMCCNo.3.15413的黄曲霉LB-Y4。

前述黄曲霉LB-Y4(AspergillusflavusLB-Y4)保藏于中国微生物菌种保藏 管理委员会普通微生物中心，其地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号， 中国科学院微生物研究所，保藏日期2014年10月23日，保藏编号为：CGMCC No.3.15413。

本发明还提供了制备前述黄曲霉的抑菌代谢产物的方法，包括如下步骤：

(1)发酵：取保藏号为CGMCCNo.3.15413的黄曲霉LB-Y4，接种于 添加有终浓度为20g/L可溶性淀粉和8g/L蛋白胨的PD培养基中，在 28℃±1℃、180转/分的条件下摇床培养，培养7～10天，过滤，得发酵上清 液和菌丝体；

(2)提取：

取步骤(1)的发酵上清液，减压浓缩，得浓缩液，醇沉，用乙酸乙酯萃 取3次，合并乙酸乙酯相，即为发酵上清液的乙酸乙酯萃取物；

取步骤(1)的菌丝体，烘干，研碎，加入50倍(v/w)的无水乙醇超声 提取60min，后用乙酸乙酯萃取，得乙酸乙酯相，即为菌丝体的乙酸乙酯萃 取物；

合并收集发酵上清液的乙酸乙酯萃取物及菌丝体的乙酸乙酯萃取物，减 压浓缩至浸膏，即得。

步骤(2)中，醇沉方法是：加入浓缩液三倍体积的无水乙醇，静置12h。

本发明还提供了前述方法制备得到的抑菌代谢产物及其在制备抗细菌药 物或消毒剂中的用途。

所述抗细菌药物或消毒剂是抗金黄色葡萄球菌的药物或消毒剂。

本发明还提供了一种抗菌药物或消毒剂，它是以前述抑菌代谢产物为活 性成分，加上药品上或消毒剂上可接受的辅料制备而成的制剂。

所述抗细菌药物或消毒剂是液体制剂、气体制剂、固体制剂或半固体制 剂。

本发明提供的新的黄曲霉的代谢产物具有抑制金黄色葡萄球菌等细菌的 活性，可以制备抗细菌药物或消毒剂，也是寻找新型抗生素的重要微生物资 源，临床应用前景良好。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的 细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡 基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1为本发明所述黄帚橐吾内生真菌黄曲霉LB-Y4在PDA平板上的形 态。

图2为黄曲霉LB-Y4在发酵培养基种的形态。

图3为黄曲霉LB-Y4孢子形态特征。

图4为代谢产物的抑菌效果图。

具体实施方式

实验材料和试剂：

实施例1本发明黄曲霉的分离鉴定

1、分离

1.1常规内生真菌分离法

将健康黄帚橐吾叶片中间部分剪成2mm小片，镊子将小片浸于75％酒 精30S，无菌水漂洗2～3次，3％NaClO2～3min，再浸入75％酒精30S，无菌 水漂洗2～3次，用最后一次无菌水作对照，无菌镊子取出小叶片将其平贴于 PDA平板上，每皿内放置6小片，用封口膜封口后室温下放置5天后连续观 察统计出现的菌落形态和数量，若对照组没有长出任何菌，则说明表面消毒 完全。

1.2内生真菌菌种纯化