[发明专利]一种猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法有效
申请号: | 201410701027.3 | 申请日: | 2014-11-28 |
公开(公告)号: | CN104480090A | 公开(公告)日: | 2015-04-01 |
发明(设计)人: | 张革;唐章勇;余茂军;周后杰;陈红兵 | 申请(专利权)人: | 四川德博尔制药有限公司 |
主分类号: | C12N9/64 | 分类号: | C12N9/64;C07K14/47;C07K1/14 |
代理公司: | 成都蓉信三星专利事务所(普通合伙) 51106 | 代理人: | 刘克勤 |
地址: | 618300 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种猪 胃蛋白酶 胃膜素 制备 方法 | ||
1. 一种猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)粗提液的制备:取猪胃基底部粘膜,加入4%盐酸水溶液,用量按1kg猪胃基底部粘膜计算为270ml,搅拌均匀,升温至44~46℃,30min后调节PH至2.2~2.4,恒温酸化3小时,用40目尼龙网过滤,将滤出的酸化胃浆液降温至0~3℃;
(2)分离:向酸化胃浆液中加入PH2.0~5.0的酸性水溶液,搅拌均匀,静置5~6h后,上层清液过滤至澄清得胃蛋白酶清液,收集备用,下层沉淀离心,取离心清液过滤至澄清得胃蛋白酶清液,收集备用,离心后的滤渣,加入PH2.0~5.0酸性水溶液,搅拌均匀,静置20分钟后离心,取离心清液过滤至澄清得胃蛋白酶清液,收集备用,滤渣备用;
(3)胃膜素的制备:滤渣经脱水、干燥得胃膜素;
(4)胃蛋白酶的制备:取收集的胃蛋白酶清液,浓缩、透析、干燥得胃蛋白酶。
2.根据权利要求1所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的向酸化胃浆液中加入的酸性水溶液用量为4~12倍酸化胃浆液体积。
3.根据权利要求2所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的向酸化胃浆液中加入的酸性水溶液用量为8倍酸化胃浆液体积。
4.根据权利要求1所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的向滤渣中加入的酸性水溶液用量为按1g滤渣计算为1~4ml。
5. 根据权利要求4所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的向滤渣中加入的酸性水溶液用量为用量为按1g滤渣计算为2ml。
6. 根据权利要求1所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的酸性水溶液的PH值为3.0。
7. 根据权利要求1所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的酸性水溶液的温度为8~10℃。
8.根据权利要求7所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的酸性水溶液的温度为9℃。
9.根据权利要求1所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的酸性水溶液的酸为:盐酸、硫酸、醋酸、磷酸中的一种。
10.根据权利要求1所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(4)所述的胃蛋白酶清液的浓缩、透析、干燥方法为:将胃蛋白酶清液调节温度至10~15℃,选用5~10kd分子量膜超滤浓缩至胃蛋白酶浓度为15%,超滤浓缩的进液压力为0.2MPa,回流压力为0.1~0.16MPa,向浓缩液中分批加入等体积8~10℃纯化水进行透析,直至用硝酸银检测出液无氯离子,收集截留液,截留液用于喷雾干燥,喷干进风温度110~125℃,尾风温度66~75℃。
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