[发明专利]一种猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法有效

专利信息
申请号: 201410701027.3 申请日: 2014-11-28
公开(公告)号: CN104480090A 公开(公告)日: 2015-04-01
发明(设计)人: 张革;唐章勇;余茂军;周后杰;陈红兵 申请(专利权)人: 四川德博尔制药有限公司
主分类号: C12N9/64 分类号: C12N9/64;C07K14/47;C07K1/14
代理公司: 成都蓉信三星专利事务所(普通合伙) 51106 代理人: 刘克勤
地址: 618300 四*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 种猪 胃蛋白酶 胃膜素 制备 方法
【权利要求书】:

1. 一种猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于包括以下步骤:

(1)粗提液的制备:取猪胃基底部粘膜,加入4%盐酸水溶液,用量按1kg猪胃基底部粘膜计算为270ml,搅拌均匀,升温至44~46℃,30min后调节PH至2.2~2.4,恒温酸化3小时,用40目尼龙网过滤,将滤出的酸化胃浆液降温至0~3℃;

(2)分离:向酸化胃浆液中加入PH2.0~5.0的酸性水溶液,搅拌均匀,静置5~6h后,上层清液过滤至澄清得胃蛋白酶清液,收集备用,下层沉淀离心,取离心清液过滤至澄清得胃蛋白酶清液,收集备用,离心后的滤渣,加入PH2.0~5.0酸性水溶液,搅拌均匀,静置20分钟后离心,取离心清液过滤至澄清得胃蛋白酶清液,收集备用,滤渣备用;

(3)胃膜素的制备:滤渣经脱水、干燥得胃膜素;

(4)胃蛋白酶的制备:取收集的胃蛋白酶清液,浓缩、透析、干燥得胃蛋白酶。

2.根据权利要求1所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的向酸化胃浆液中加入的酸性水溶液用量为4~12倍酸化胃浆液体积。

3.根据权利要求2所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的向酸化胃浆液中加入的酸性水溶液用量为8倍酸化胃浆液体积。

4.根据权利要求1所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的向滤渣中加入的酸性水溶液用量为按1g滤渣计算为1~4ml。

5. 根据权利要求4所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的向滤渣中加入的酸性水溶液用量为用量为按1g滤渣计算为2ml。

6. 根据权利要求1所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的酸性水溶液的PH值为3.0。

7. 根据权利要求1所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的酸性水溶液的温度为8~10℃。

8.根据权利要求7所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的酸性水溶液的温度为9℃。

9.根据权利要求1所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(2)所述的酸性水溶液的酸为:盐酸、硫酸、醋酸、磷酸中的一种。

10.根据权利要求1所述的猪胃蛋白酶和胃膜素的制备方法,其特征在于:步骤(4)所述的胃蛋白酶清液的浓缩、透析、干燥方法为:将胃蛋白酶清液调节温度至10~15℃,选用5~10kd分子量膜超滤浓缩至胃蛋白酶浓度为15%,超滤浓缩的进液压力为0.2MPa,回流压力为0.1~0.16MPa,向浓缩液中分批加入等体积8~10℃纯化水进行透析,直至用硝酸银检测出液无氯离子,收集截留液,截留液用于喷雾干燥,喷干进风温度110~125℃,尾风温度66~75℃。

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