[发明专利]一种高纯度黑木耳腺苷的制备方法在审
申请号: | 201410701069.7 | 申请日: | 2014-11-28 |
公开(公告)号: | CN105693799A | 公开(公告)日: | 2016-06-22 |
发明(设计)人: | 戴路 | 申请(专利权)人: | 哈尔滨墨医生物技术有限公司 |
主分类号: | C07H19/167 | 分类号: | C07H19/167;C07H1/08 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 150046 黑龙江省哈尔滨市香坊*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纯度 黑木耳 腺苷 制备 方法 | ||
1.一种高纯度黑木耳腺苷的制备方法,其特征在于:具体操作方法依次按下列步骤:
(1)黑木耳腺苷分子印迹聚合物的制备:称取纯度为98%以上的黑木耳腺苷标准品,溶于60~70倍重量的丙酮中,与甲基丙烯酸或丙烯酰胺功能单体,交联剂,引发剂混合,混合均匀后,超声处理10~20min,氮吹15min,密封,置于60℃水浴聚合反应24h,粉碎,过180目筛,烘干,置于烧杯中,加入黑木耳腺苷重量50倍的洗脱液,其中甲醇:乙酸的体积比为8:2,超声洗脱30min,抽滤,取滤渣重复上述过程,直至洗脱液在429nm波长检测无吸收,将洗脱后的滤渣置于烘箱中,烘干,得到黑木耳腺苷分子印迹聚合物;
(2)将黑木耳原料粉碎至细度为80目,加入50~60倍重量的水,加入果胶酶、植物水解酶、复合纤维素酶充分酶解,制得黑木耳提取液,将提取液浓缩,喷雾干燥,获得黑木耳提取物,将粉末粉碎过50~60目筛,按照1:1~4比例称取黑木耳提取物和分子印迹聚合物,混合均匀,研磨均化5~10min,得到混合粉末;
(3)将步骤(2)得到的混合粉末移入装有玻璃棉垫底的注射器中,再在混合粉末上方放置玻璃棉,压实;
(4)将淋洗液倒入压实的注射器中,以1~2ml/min的流速淋洗,其中注射器中混合粉末的质量与淋洗液的体积比为1g:5~25ml,淋洗掉黑木耳提取物中除黑木耳腺苷以外的其他组分;
(5)将洗脱剂倒入淋洗后的注射器中,以1~2ml/min的流速洗脱,其中注射器中混合粉末的质量与洗脱剂的体积比为1g:5~25ml,洗脱目标物为黑木耳腺苷。
2.根据权利要求1所述的一种高纯度黑木耳腺苷的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中,交联剂为三甲氧基丙烷三甲基丙烯酸酯,引发剂为偶氮二异丁晴。
3.根据权利要求1所述的一种高纯度黑木耳腺苷的制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中,玻璃棉的厚度为2mm~3mm,混合粉末的质量与淋洗剂的体积比为1g:10~20ml。
4.根据权利要求1所述的一种高纯度黑木耳腺苷的制备方法,其特征在于:所述步骤(4)中,淋洗剂为甲醇水溶液或乙醇水溶液,其中甲醇或乙醇与水的体积比为1:10~20。
5.根据权利要求1所述的一种高纯度黑木耳腺苷的制备方法,其特征在于:所述步骤(5)中,洗脱剂为乙酸与甲醇或乙醇的混合溶液,其中乙酸与甲醇或乙醇的体积比为1:10~50;混合粉末的质量与洗脱剂的体积比为1g:10~20ml。
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