[发明专利]一种液相色谱仪

说明书

技术领域

本发明属于液相色谱领域，具体涉及一种具有在线清洗功能的液相色谱仪。

背景技术

   液相色谱仪(Liquid Chromatography / LC)的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离。使用色谱泵将含有样品的流动相通过一固定于色谱柱中与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。

   在常规液相色谱的基础上，发展出一种具有样品在线处理或二维分离能力的二维液相色谱(2D-LC)，二维液相色谱是将分离机理不同而又相互独立的两支色谱柱串联起来构成的分离系统。样品经过第一维液相的色谱柱进入接口中，通过浓缩、捕集或切割后被切换进入第二维液相的色谱柱及检测器中。二维液相色谱通常采用两种不同的分离机理分析样品，即利用样品的不同特性把复杂混合物(如肽)分成单一组分，这些特性包括分子尺寸、等电点、亲水性、电荷、特殊分子间作用(亲和)等，在一维分离系统中不能完全分离的组分，可能在二维系统中得到更好的分离，因此分离能力、分辨率得到极大的提高。

现有常规液相色谱仪与二维液相色谱仪有一个共同的缺陷，均不能在线清洗色谱柱、过滤器、流路管线或者保护柱。由于待分析样品中有杂质等原因，随着色谱柱使用时间的增加，色谱柱中会积累杂质，从而导致色谱柱效变差，影响分析的准确性，严重的会出现堵柱现象，导致不能使用。现有技术中色谱柱一般使用越久，所分析的样品越脏，劣化速度越快，根据变差程度的不同，导致色谱峰变形的程度不同，严重的时候导致色谱系统崩溃及或者测定结果的不准确，因此经常需要在做完样品分析后清洗色谱柱,另外有时从样品或流动相中带入的不溶性颗粒会堵塞管路、过滤器或保护器，造成管路破裂、系统超压等问题。 

尤其在二维液相色谱中，第一维色谱柱通常用于“很脏”样品（比如血浆、中药粗提液、动植物组织粗提液等）的初级分离，分析样品的数量与次数越多，累积在色谱柱上不能被所用流动相洗脱的物质就越多，样品中也有可能含有微小的不溶性颗粒，因此很容易发生色谱系统堵塞情况，色谱柱的劣化速度也很快，通常使用寿命小于1000次。因此需要对样品中不溶性颗粒进行拦阻，并对劣化后的色谱柱进行不定期的清洗。另外第一维色谱柱失效后，脏的物质容易传递给后级的色谱柱，导致第二维的色谱系统发生故障，因此后级的色谱柱也需要不定期清洗；另外越“脏”的样品，越容易在液相色谱的管路中析出不溶性颗粒，导致严重的系统堵塞甚至崩溃。

现有解决以上问题的技术之一是在色谱仪进样器与色谱柱中增加保护柱或者过滤器，当保护柱或过滤器效果变差或者导致系统压力上升的时候，停止液相色谱运行，更换失效的保护柱或者过滤器，这种解决方法需要更换材料，导致成本增加；另外需要先停止分析才能进行更换工作，影响液相色谱的工作效率；并且需要人工操作，对实现色谱仪高度自动化带来障碍。

现有解决以上问题的另一技术是在样品分析完成后，停止分析，用洗脱能力比较强的流动相冲洗液相色谱仪及色谱柱，将部分杂质冲洗下来。但这种方法对于保留很强的杂质和微小颗粒导致的色谱柱失效没有作用；另外需要耗费较长时间；并且不能在分析样品的同时进行，同样无法实现色谱仪的高度自动化运行。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明旨在实现以下几个目的：

本发明的目的之一：实现第一色谱柱的在线清洗功能。

本发明的目的之二，实现中间色谱柱的在线清洗功能。

本发明的目的之三：实现同时对第一色谱柱和中间色谱柱的在线清洗功能。

本发明的目的之四：实现过滤器或者保护器的在线清洗功能。

本发明的目的之五：调制第一流动相，使第一流动相的酸碱度、离子强度或溶剂比例发生改变，使得第一色谱柱或中间色谱柱上相容的杂质能被洗脱下来，进一步实现在线清洗功能。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

一种液相色谱仪，包括：

连接有进样器的第一流道,用于输送第一流动相；

第二流道，用于输送第二流动相；

分析流道，用于对捕获的物质进行分离和检测；

废液流道，包括第一废液流道和第二废液流道，用于排除废液；