[发明专利]适合玻璃体内施用的VEGF拮抗剂的制剂

说明书

本申请是申请日为2007年6月14日、申请号为200780022555.4、发明名称为“适合玻璃体内施用的VEGF拮抗剂的制剂”的发明专利申请的分案申请。 

发明背景 

发明领域

本发明涉及适合玻璃体内施用的包含能够抑制血管内皮生长因子(VEGF)的药剂的药物制剂，以及制备和使用该制剂的方法。本发明包括具有增强的稳定性的液体药物制剂，以及可以冻干并重新溶解用于玻璃体内施用的制剂。 

相关技术的情况 

血管内皮生长因子(VEGF)的表达在人的癌症中几乎普遍存在，这与它作为肿瘤新血管发生的关键介体的作用是相符的。在多个不同的异种移植模型中，通过与该分子或它的VEGFR-2受体结合，VEGF功能的阻断抑制了移植的肿瘤细胞的生长(参见，例如Gerber等人，(2000)Cancer Res.60：6253-6258)。已经描述了一种可溶的VEGF特异性融合蛋白拮抗剂，称作“VEGF捕捉剂”(Kim等人，(2002)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 99：11399-404；Holash等人，(2002)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 99：11393-8)。 

眼用制剂是已知的，参见例如，U.S.7,033,604和6,777,429。在US 6,676,941中描述了一种VEGF抗体的眼用制剂。 

冻干(在控制条件下冷冻干燥)通常用于蛋白质的长期储藏。在冷冻干燥状态时，冻干的蛋白质实质上耐降解、聚集、氧化和其他变性过程(参见，例如U.S.6,436,897) 

发明简述 

提供了VEGF特异性融合蛋白拮抗剂的稳定制剂。提供了药学可接受的制剂，其包含VEGF“捕捉剂”拮抗剂和药学可接受的载体。在具体的实施方案中，提供了液体和冻干的制剂。 

在第一个方面，提供了VEGF特异性融合蛋白拮抗剂的稳定的液体眼用制剂，其包含含有受体组分的融合蛋白和多聚化组分(也称作“VEGF捕捉剂”)，其中所述受体组分基本上由第一VEGF受体的免疫球蛋白样(Ig)结构域2和第二VEGF受体的Ig结构域3组成。在VEGF特异性融合蛋白拮抗剂的一个具体的实施方案中，第一VEGF受体是Flt1，第二VEGF受体是Flk1或Flt4。在一个更具体的实施方案中，该融合蛋白具有SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：4的氨基酸序列。优选地，该VEGF拮抗剂是包含SEQ ID NO：4的两种融合蛋白的二聚体。 

在一个方面，提供了一种稳定的液体眼用制剂，其包含1-100mg/ml VEGF特异性融合蛋白拮抗剂，0.01-5％的一种或多种有机共溶剂，30-150mM的一种或多种张度剂，5-40mM的缓冲剂和任选地，1.0-7.5％的稳定剂，pH为约5.8-7.0。 

在一个或多个具体的实施方案中，有机共溶剂可以是聚山梨酯例如聚山梨酯20或聚山梨酯80，聚乙二醇(PEG)例如PEG 3350或丙二醇，或其组合；张度剂可以是，例如，氯化钠或氯化钾；稳定剂可以是蔗糖、山梨糖醇、甘油、海藻糖或甘露醇；并且缓冲剂可以是，例如，磷酸盐缓冲液。在一个具体的实施方案中，磷酸盐缓冲液是磷酸钠缓冲液。 

在各种实施方案中，有机共溶剂是聚山梨酯和/或PEG，稳定剂是蔗糖，缓冲剂是磷酸盐缓冲液并且张度剂是氯化钠。 

更具体地，该稳定的液体眼用制剂包含约40-50mg/ml的VEGF拮抗剂(SEQ ID NO：4)，约10mM磷酸盐缓冲液，0.01-3％聚山梨酯和/或PEG，40-135mM氯化钠和任选的5.0％蔗糖，pH约6.2-6.3。 

在一个具体的优选实施方案中，该稳定的液体眼用制剂包含约50 mg/ml的VEGF拮抗剂(SEQ ID NO：4)，10mM磷酸钠缓冲液，50mM氯化钠，0.1％聚山梨酯和5％蔗糖，pH约6.2-6.3。 

在一个具体的优选实施方案中，该稳定的液体眼用制剂包含约50mg/ml的VEGF拮抗剂(SEQ ID NO：4)，10mM磷酸钠缓冲液，50mM氯化钠，3％PEG和5％蔗糖，pH约6.2-6.3。 

在一个具体的优选实施方案中，该稳定的液体眼用制剂包含约40mg/ml的VEGF拮抗剂(SEQ ID NO：4)，10mM磷酸钠缓冲液，40mM氯化钠，0.03％聚山梨酯和5％蔗糖，pH约6.2-6.3。