[发明专利]一种二萜醇酯类化合物千金子1号的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及化合物生产领域，尤其是一种二萜醇酯类化合物千金子1号的制备方法。

背景技术

千金子是一种少用的有毒中药，主要含有大量脂肪油，还含有二萜、香豆素、挥发油等化合物，现代研究表明，二萜类化合物是其主要成分，也是其重要的活性成分。千金子含有结构独特的千金二萜烷型成分L-factor(L-因子)，此类成分除具有诸多药理活性外，其结构中的多个环可能通过跨环环合作用进一步产生复杂的多环结构。

恶性肿瘤是一种原因未明的严重疾病,目前以手术、放疗、化疗为主,手术多适用于早期癌瘤患者,放、化疗只对敏感瘤种有效,但同时又会出现严重的毒副反应和后遗症，甚至造成严重的医源性疾病而危及生命，中草药的抗癌作用受到越来越多的重视。目前，已有大量临床研究证实中药具有改善癌症患者生存质量，延长生存期，稳定癌细胞，提高患病机体免疫力的作用。因此从天然产物中寻找有效的抗肿瘤物质是目前研究的一个大方向。

千金子1号(Euphorbia factor L1)是千金子中的主要活性成分，在种子中含量最高，千金子1号体外试验显示出良好的抗肿瘤作用，对HeLa细胞的增殖有明显的抑制性,且呈剂量和时间依赖性。千金子1号体内外实验研究都显示出稳定的抗肿瘤活性,且与一般的抗肿瘤药物不同，该药不降低白细胞数和免疫器官指数。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种二萜醇酯类化合物千金子1号的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种二萜醇酯类化合物千金子1号的制备方法，由千金子经过粉碎、提取浓缩、分离获得，具体步骤如下：

(1)取千金子(市购)为原料，进行粉碎得到千金子粉末；

(2)千金子粉末进行有机溶剂提取，有机试剂为丙酮、乙醇、甲醇、乙酸乙酯一种或几种的组合，收集提取后的上清，进行过滤，浓缩、干燥；

(3)将步骤(2)得到的沉淀重复1～5次提取，有机试剂为丙酮、乙醇、甲醇乙酸乙酯一种或几种的组合，收集提取后的上清，进行过滤，浓缩、干燥，得到QJZ-6初提物；

(4)取步骤(3)得到QJZ-6初提物进行全部溶解，经制备液相DAC正相色谱柱进行分离，采用二元流动相体系进行洗脱分离，所述流动相A和流动相B采用正己烷、乙醇的组合，洗脱方式为梯度洗脱，检测波长为210nm，收集目的峰，干燥后得到目标单体化合物QJZ-6。

上述目标单体化合物QJZ-6即为千金子1号(Euphorbia factor L1)，分子式为C₃₂H₄₀O₈(简称为QJZ-6)，分子量552.64，名称为：6，17－环氧千金二萜醇－5，15－二乙酸－3－苯乙酸酯，其化学结构式为(Ⅰ)所示，

上述目标单体化合物QJZ-6的C-2、C-3、C-6、C-9手性碳原子S构型，C-4、C-5、C-11、C-15手性碳原子R构型。

优选的，上述二萜醇酯类化合物千金子1号的制备方法，所述步骤(2)、(3)中提取的温度为40～60℃，提取时间为4～6h。

优选的，上述二萜醇酯类化合物千金子1号的制备方法，所述步骤(2)、(3)中所述千金子粉或沉淀与有机试剂的重量体积比按Kg：L计为1:(3～8)，将千金子粉或沉淀与有机试剂进行混合浸提。

上述二萜醇酯类化合物千金子1号可在制备抗肿瘤药物中进行应用。

优选的，上述二萜醇酯类化合物千金子1号的应用，所述肿瘤为肝癌和/或肺癌。

本发明的有益效果是：

上述二萜醇酯类化合物千金子1号的制备方法，步骤简便，重复性好，实用性高，适用于大规模工业化生产的需要，所分离纯化的二萜醇酯类化合物千金子1号纯度最高可高达99％，化合物性质稳定，具有抗癌活性。

附图说明

图1所示的是本发明所述QJZ-6单体的HPLC分析图；

图2所示的是本发明所述QJZ-6的核磁共振分析图，其中(a)为1D1HNMR谱(CDCl3,400MHz)的数据图谱，(b)为1D13CNMR谱(CDCl3,100MHz)的数据图谱，(c)为HSQC数据图谱，(d)为DEPT 135数据图谱,(e)为COSY数据图谱；

图3是本发明实施例2制备液相正相色谱分离图，其中横坐标为采集时间(min)，纵坐标为信号强度(MV)，曲线为色谱曲线；

图4是QJZ-6抑制人肝癌细胞Hep-g2生长的实时数据监测图；