[发明专利]蝶花杜鹃的组培繁殖方法有效
申请号: | 201410707703.8 | 申请日: | 2014-11-28 |
公开(公告)号: | CN104365484A | 公开(公告)日: | 2015-02-25 |
发明(设计)人: | 张敬丽;李枝林;张巧玲;郑硕理;王有国;易陈燃;吴红芝 | 申请(专利权)人: | 云南农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 昆明协立知识产权代理事务所(普通合伙) 53108 | 代理人: | 马晓青 |
地址: | 650201 云南*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 杜鹃 繁殖 方法 | ||
1.蝶花杜鹃的组培繁殖方法,包括选择外植体,消毒,经种子萌发、丛生芽诱导、壮苗并生根培养,试管苗移栽步骤,其特征在于外植体取蝶花杜鹃的种子,种子萌发培养基为改良Anderson+0.1mg/L NAA,丛生芽诱导培养基为1/4MS+3.5mg/L ZT+0.2mg/L IAA+1.0mg/L KT,pH5.4-5.6;壮苗培养基为改良Anderson+0.5mg/L 2-IP+0.1mg/L NAA,生根培养基为改良Anderson+0.2mg/L ZT+1mg/l NAA+0.5g/L AC,其中所述的改良Anderson培养基为NH4NO3减半。
2.根据权利要求1所述的组培繁殖方法,其特征在于所述外植体消毒先用5%洗衣粉水浸泡清洗10min,再用无菌水冲洗3-5遍至无泡沫,然后采用75%的酒精消毒40s,无菌水冲洗3遍后再用0.1%升汞溶液进行表面消毒6min,不断震荡后用无菌水清洗3-5遍。
3.根据权利要求1所述的组培繁殖方法,其特征在于所述丛生芽诱导和壮苗及生根培养的温度均为20-23℃,湿度30-50%。
4.根据权利要求1所述的组培繁殖方法,其特征在于所述丛生芽诱导和壮苗及生根培养的光照条件均为自然光2000‐2500LUX+人工辅助光1500‐2000LUX。
5.根据权利要求1所述的组培繁殖方法,其特征在于所述的试管苗移栽是生根组培苗在培养瓶内培养40天,炼苗7天后,移栽于温室大棚。
6.根据权利要求1所述的组培繁殖方法,其特征在于所述的试管苗移栽基质为1份珍珠岩+1份腐殖土,pH为5.4-5.6。
7.根据权利要求1所述的组培繁殖方法,其特征在于所述的试管苗移栽在早上8-11点,温度为18-25℃下进行。
8.根据权利要求书1-7中的任意一项所述的组培繁殖方法,其特征在于选取蝶花杜鹃种子为外植体,用5%的洗衣粉水浸泡10分钟后,反复冲洗3-5遍直至无泡沫,然后用75%酒精消毒40s,再用0.1%升汞溶液消毒6min,不断震荡后用无菌水清洗3-5遍;将种子置于消毒后的滤纸上吸干水分,接种至诱导萌发培养基改良Anderson+0.1mg/l NAA,pH5.4-5.6,温度20-23℃,湿度30-45%,光照条件为自然光2000‐2500LUX+人工辅助光1500‐2000LUX下培养,长出无菌苗后转接入丛生芽诱导培养基1/4MS+3.5mg/L ZT+0.2mg/L IAA+1.0mg/L KT中进行增殖,待丛生芽长到2-3cm转入壮苗培养基改良Anderson+0.5mg/L 2-IP+0.1mg/L NAA进行壮苗,完成壮苗周期后将苗转入生根培养基,生根培养基为改良Anderson+0.2mg/L ZT+1mg/l NAA+0.5g/L AC,40天生根培养后进行组培苗炼苗7天后,移栽于基质为1份珍珠岩+1份腐殖土,pH为5.4-5.6,湿度50-60%的大棚内,每天早晚各喷水一次;其中所述的改良Anderson培养基为NH4NO3减半。
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