[发明专利]检测地中海贫血相关基因突变的试剂盒及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及引物组及其应用、试剂盒及其应用。

背景技术

珠蛋白生成障碍性贫血，原名地中海贫血，又称海洋性贫血，是一组遗传性溶血性贫血疾病。由于遗传的基因缺陷致使血红蛋白中一种或一种以上珠蛋白链合成缺如或不足所导致的贫血或病理状态。缘于基因缺陷的复杂性与多样性，使缺乏的珠蛋白链类型、数量及临床症状变异性较大。

珠蛋白链的分子结构及合成是由基因决定的。γ、δ、ε和β珠蛋白基因组成“β基因族”，ζ和α珠蛋白组成“α基因族”。正常人自父母双方各继承2个α珠蛋白基因(αα/αα)合成足够的α珠蛋白链；自父母双方各继承1个β珠蛋白基因合成足够的β珠蛋白链。由于珠蛋白基因的缺失或点突变，肽链合成障碍导致发病。地中海贫血分为α型、β型、δβ型和δ型4种，其中以β和α地中海贫血较为常见。

β珠蛋白生成障碍性贫血(简称β地贫)的发生的分子病理相当复杂，已知有100种以上的β基因突变，主要是由于基因的点突变，少数为基因缺失。大多数α珠蛋白生成障碍性贫血(地中海贫血)(简称α地贫)是由于α珠蛋白基因的缺失所致，少数由基因点突变造成。白基因的缺失所致，少数由基因点突变造成。

对于少见类型和各种类型重叠所致的复合体则非常复杂，临床表现各异，仅根据临床特点和常规实验室血液学检查是无法诊断的。而且由于基因调控水平的差异，相同基因突变类型的患者不一定有相同的临床表现。血红蛋白电泳检查是诊断本病的必备条件，但输血治疗后的血液学检查会与实际结果有所不同。所以进行遗传学和分子生物学检查才能最后确诊。遗传学检查可确定为纯合子、杂合子以及双重杂合子等。

但是目前生物学检查检测单一、灵敏度不高，因此提供一种检测地中海贫血的引物组及试剂盒具有现实意义。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种引物组及其应用、试剂盒及其应用。该引物对组相关基因位点所在基因片段进行扩增。该引物组和试剂盒能够有效地检测α和β地中海贫血的野生型和突变型结果，可行性好，灵敏度高。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种用于扩增地中海贫血基因核苷酸片段的引物组，其包括引物组A和/或引物组B；

所述引物组A包括如下序列的引物：

所述引物组B具有如下序列所示的引物：

本发明还提供了上述引物组在检测地中海贫血基因突变中的应用。

在本发明的一些实施例中，所述地中海贫血为α地中海贫血和/或β地中海贫血。

在本发明的一些实施例中，α地中海贫血为非缺失型α地中海贫血。

在本发明的另一些实施例中，α地中海贫血为缺失型α地中海贫血。

本发明还提供了一种检测地中海贫血基因突变的试剂盒，包括上述引物组。

本发明提供的试剂盒，还包括芯片和探针。

在本发明的一些实施例中，所述探针包括探针组C和/或探针组D；

所述探针组C具有如下序列的探针：

所述探针组D具有如下序列的探针：

在本发明提供的试剂盒中，还包括表面化学质控探针、杂交质控探针和阴性对照探针。

在本发明的一些实施例中，所述表面化学质控探针具有如SEQ ID No.123所示的序列。

在本发明的一些实施例中，所述杂交质控探针具有如SEQ ID No.124所示的序列。

在本发明的一些实施例中，所述阴性对照探针具有如SEQ ID No.125所示的序列。

本发明还提供了上述试剂盒在检测地中海贫血基因突变中的应用。

在本发明的一些实施例中，所述地中海贫血为α地中海贫血和/或β地中海贫血。

在本发明的一些实施例中，α地中海贫血为非缺失型α地中海贫血。