[发明专利]一种用于检测金黄色葡萄球菌的荧光显色培养基

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物检测的培养基，尤其涉及一种用于检测金黄色葡萄球菌的荧光显色培养基。

背景技术

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)为条件致病菌，是人类化脓感染中最常见的病原菌，也是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属(Staphylococcus)，有“嗜肉菌的别称，是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至引起败血症、脓毒症等全身感染。当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品，如牛奶盒奶制品、肉、蛋等，在温度条件适宜时，经8-10小时即可产生相当数量的肠毒素，从而引发不同程度的急性胃肠炎症状。

金黄色葡萄球菌主要通过Barid-Parker琼脂选择性培养基显色培养。在该培养基上金黄色葡萄球菌呈现黑色菌落，周围有透明圈。但是研究发现，一些非金黄色葡萄球菌比如腐生葡萄球菌、缓慢葡萄球菌及赛氏葡萄球菌同样表现出上述特征，造成假阳性。发明专利CN201310603799.9公布了一种用于区分金黄色葡萄球菌和其他葡萄球菌的显色培养基，同时为了达到更好的选色效果，选用特定助显色剂帮助显色。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测金黄色葡萄球菌的荧光显色培养基，在助显色剂不存在的情况下，为区分金黄色葡萄球菌和其他葡萄球菌的提供更简便的显色方案。

本发明的所采用的技术方案为：

一种用于检测金黄色葡萄球菌的显色培养基，含有氮源、碳源、氯化钠、杂菌生长抑制剂，还包括金黄色葡萄球菌显色底物4-甲基伞型酮-对硝基β-D-葡萄糖苷、β-D-葡萄糖苷，非金黄色葡萄球菌显色底物对硝基酚-α-D-吡喃半乳糖，非金黄色葡萄球菌显色底物对硝基苯酚β-D-葡萄糖醛酸苷。

优选的，所述4-甲基伞型酮-β-D-葡萄糖苷为0.5-5g/L。

优选的，所述4-甲基伞型酮-β-D-葡萄糖苷为1-2g/L。

优选的，所述对硝基β-D-葡萄糖苷为1-6g/L。

优选的，所述对硝基β-D-葡萄糖苷为3g/L。

优选的，所述硝基酚-α-D-吡喃半乳糖的含量为2-5g/L。

优选的，所述硝基苯酚β-D-葡萄糖醛酸苷为0.6-1.5g/L。

优选的，上述显色培养基，每1000mL培养基含有牛肉膏3-10g，蛋白胨5-15g，琼脂10-30g，氯化钠10-20g，牛胆盐1-5g、头孢克肟0.01-0.06mg，丙酮酸钠5-15g。

优选的，所述培养基还含有金黄色葡萄球菌生长促进剂丙酮酸钠。

牛肉膏、蛋白胨、琼脂、氯化钠为葡萄球菌生长提供适宜的生长环境，利于其快速增长。高盐条件可以促进金黄色葡萄球菌生长，同时抑制杂菌生长。

丙酮酸钠是金黄色葡萄球菌的生长促进剂。

头孢克肟可以抑制大部分革兰氏阴性菌的生长，牛胆盐可以抑制大部分革兰氏阳性菌的生长。

硝基酚-α-D-吡喃半乳糖为α-D-半乳糖苷酶的显色底物，可以被非金黄色葡萄球菌降解，产生对硝基酚。

硝基苯酚β-D-葡萄糖醛酸为β-D-葡萄糖醛酸酶的显色底物，可以被非金黄色葡萄球菌降解，产生对硝基苯酚。

金黄色葡萄球菌和其他葡萄球菌可以作用于4-甲基伞型酮-β-D-葡萄糖苷，生成具有强烈荧光的4-甲基伞型酮，产生荧光显微镜下可见菌落。金黄色葡萄球菌和其他葡萄球菌产生的碱性磷酸酶作用于对硝基β-D-葡萄糖苷，生成对硝基苯，产生黄色菌落。但是金黄色葡萄球菌不能分解硝基酚-α-D-吡喃半乳糖、硝基苯酚β-D-葡萄糖醛酸。而其他葡萄球菌可以分解硝基酚-α-D-吡喃半乳糖或硝基苯酚β-D-葡萄糖醛酸，产生黄色产物，从而产生与金黄色葡萄球菌一样的表观菌落颜色。

因此本发明公布的荧光显色培养基中，非葡萄球菌显菌落本身的颜色，葡萄球菌显示黄色菌落颜色，金黄色葡萄球菌显示黄色菌落颜色并在荧光显微镜下可见。

本发明的有益效果是：本发明的显色培养基为金黄色葡萄球菌的检测提供了一种荧光显色方案，在助显色剂不存在的情况下亦能有效的区分部分葡萄球菌与非葡萄球菌、金黄色葡萄球菌与非金黄色葡萄球菌，简化细菌显色培养过程。

具体实施方式