[发明专利]一种尿液中对羟基苯丙氨酸检测试剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种尿液中对羟基苯丙氨酸检测试剂的制备方法。

背景技术

随着全球城市化、工业化、老龄化进程的加剧，加之生存环境的污染、各种不良生活方式、职业暴露、生物物理和遗传因素的影响，全世界恶性肿瘤的发病率和死亡率呈逐年上升的趋势，我国也不例外，恶性肿瘤已成为严重危害人类生命健康的重要疾病之一。流行病学调查数据显示，我国恶性肿瘤死亡率属于世界较高水平，我国恶性肿瘤死亡率已上升为居民死因顺位的第一位，而且与生态环境、生活方式相关的肿瘤呈现持续性增长势头。目前关于肿瘤发生的原因并未完全阐明，故而缺乏有效的预防手段。

目前，肿瘤的临床诊断主要依据于患者的临床表现、各种影像学检查和实验室检测技术。但是，临床上很多癌症患者在早期并无明显的症状，发现时往往已到了晚期，比如肝癌和卵巢癌，在早期基本上无任何症状。各种影像学检测技术，如X线、B超、CT、磁共振，作为重要的肿瘤辅助诊断手段，通常也不能发现较小的早期肿瘤，而且需要特殊昂贵的仪器投入，因而在应用上存在一定的局限性，尤其是不适用于大范围的肿瘤筛查以及在基层单位或者经济不发达的偏远地区使用。

现代医学经过研究发现，早期发现，是治疗肿瘤的关键，如能在肿瘤发生的早期进行检测和诊断，其治疗的成功率则会大大提高。肿瘤的发展通常分为5个阶段：良性、肿瘤细胞启动期、肿瘤早期、肿瘤中期、晚期。实际上，在肿瘤发展的前4个阶段早期发现、早期治疗，都是可以完全治愈的，在前三个阶段发现并治疗，治愈率可达100％。癌症的可怕之处，就在于前三个阶段，影像学根本无法检测出来，即便到了肿瘤中期，也只有非常专业的医生用较先进的设备才能测出。世界卫生组织的研究认为：目前1/3的癌症是可以预防的；1/3的癌症可以通过积极治疗而延长患者生命；1/3的癌症是可以通过早期发现、早期诊断、早期治疗而痊愈的。这意味着肿瘤的早期发现成为可能，对癌症的治疗和预防也具有重要意义。

根据对大量正常人，一般病人及癌症患者尿样的核磁共振分析，发现癌症患者尿液中有特异性物质，该物质属羟基苯基衍生物，例如羟苯基丙氨酸，羟苯基丙酮酸，羟苯氨基乙酸，对羟基苯丙氨酸等。米伦(Millon)据此发明了Hg+-硝酸测定羟苯基丙氨酸的米伦试剂US5,066,601提出Hg+、Hg2+酸性溶液癌症检测试剂，用于临床。公开号为CN1096374的“癌症显示剂”专利申请，对米伦试剂加以改进，提出了Hg+，Hg²⁺和/或Ni²⁺组成的酸性溶液癌症显示试剂。根据大量的临床研究，发现该试剂存在以下问题：(1)HNO₃-H₂SO₄酸性体系的Hg⁺/Hg²⁺浓度较低，因此临床的灵敏度偏低，(2)作为稳定剂的Ni²⁺，由于Ni²⁺离子的兰绿色，当用量过多时会影响沉淀的颜色，因此影响检测。(3)由于Hg+的还原性，在空气中容易被氧化，而该显示剂中缺乏抗氧化剂或者其它抗氧化措施以致显示剂不能长期保存，影响临床应用：(4)该显示剂用金属汞置换方法以及硝酸浓度过高(例如HNO₃良度为12N)时都会释放出大量的氮化物有害气体。

发明内容

本发明针对现有技术中的不足之处，提供一种尿液中对羟基苯丙氨酸检测试剂的制备方法及装有所述检测试剂的试剂盒。

本发明通过下述技术方案得以解决：

一种尿液中对羟基苯丙氨酸检测试剂的制备方法，所述检测试剂是将分别含有Hg₂²⁺、Hg²⁺、Ni²⁺、a-亚硝基-β-萘酚的酸溶液按一定比例混合制得。

一种尿液中对羟基苯丙氨酸检测试剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)硫酸汞的制备：将硫酸汞加入6mol/L的硫酸溶液中搅拌溶解后，再用6mol/L的硫酸溶液稀释，得到浓度为15-20％(m/v)的硫酸汞溶液；

(2)硝酸亚汞溶液的制备：将硝酸亚汞加入到12mol/L的硝酸溶液中，搅拌溶解后，用12mol/L硝酸溶液稀释，得到绿色液体，放置待溶液绿色褪去后，方可使用，最终制得浓度为60-70％(m/v)的硝酸亚汞溶液；

(3)硫酸镍溶液的制备：将硫酸镍溶解到蒸馏水中，然后用蒸馏水稀释，制得蓝绿色液体，为浓度为2-5％(m/v)的硫酸镍溶液，待用；