[发明专利]黄皮果提取物及其在制备用于防治阿尔茨海默病药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及黄皮果提取物新的药物用途，具体地涉及黄皮果提取物的制备及其在制备预防和治疗阿尔茨海默病药物中的应用。

背景技术

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种常见的神经退行性疾病，也是最常见的老年痴呆症之一，临床特点表现为进行性记忆丧失和认知功能损伤，其典型的病理特征为老年斑(Senile plaques,SP)和神经原纤维缠结(Neurofibrillary tangles)的形成及受累脑区的突触和神经元受损。β淀粉样蛋白(Beta-amyloid peptide,Aβ)是老年斑的主要组成成分，研究表明Aβ具有神经毒性，能够诱发神经细胞的损伤甚至死亡。尽管Aβ的神经毒机理目前尚未完全阐明，但由其引发的氧化应激和线粒体功能障碍被认为在Aβ介导的神经细胞凋亡过程中发挥了关键作用。此外，Aβ诱发的氧化应激有助于AD老年斑和神经原纤维缠结的形成，也能促使神经细胞胞内产生氧化应激反应和线粒体能量代谢功能障碍并启动一系列病理反应致使AD病人脑区神经元广泛受损。因此,抑制Aβ生成，减少神经元凋亡和改善认知功能障碍对防治AD的发生和发展具有积极的意义。

芸香科黄皮属植物黄皮(Clausena lansium)具有很高的药用价值，其果、叶、种等均可入药，过去的研究发现黄皮叶和黄皮果核中含有黄皮酰胺类化合物有保肝、促智的作用。但尚无证据表明黄皮果提取物能预防或治疗由AD病引起的认知功能障碍，也没有相关报道指出黄皮果提取物能抑制Aβ的生成和减轻由此引起的神经细胞凋亡。

发明内容

本发明提供一种黄皮果提取物组合物，该组合物具有抗氧化、抑制Aβ的生成，减少星形胶质细胞细胞的活化，保护神经元的作用，可应用于制备防治阿尔茨海默病的药物或保健食品。

本发明还提供了黄皮果提取物在预防与治疗阿尔茨海默病药物中的应用，开辟了阿尔茨海默病防治的新方法。

本发明还提供了一种防治阿尔茨海默病药物，该药物具有抗氧化、抑制Aβ的生成，减少星形胶质细胞细胞的活化，保护神经元的作用，从而可以有效缓解该病引起的认知功能障碍，对防治阿尔茨海默病有较好的效果。

为了解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明所述的黄皮果提取物的总黄酮及有机酸含量≥75％，生物碱含量≥5％。

进一步地，鉴定出该黄皮果提取物包含四种黄酮类化合物，分别是(1).芦丁(rutin)，(2).槲皮素(quercetin)-7-O-α-L-吡喃葡萄糖苷，(3).木犀草素(Luteolin)-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，(4).槲皮素，所述黄酮类化合物的含量为≥60％；所述提取物还包括一种生物碱，是(5).黄皮酰胺(Clausenamide)，其含量≥5％所述五种化合物的结构式如下：

黄酮类化合物:

化合物(1)

化合物(2)

化合物(3)

化合物(4)

生物碱类化合物

化合物(5)

本发明的另一技术目的是提供一种黄皮果提取物，其通过以下步骤制备而成：

(1).取晒干的黄皮果，去核，粉碎，过40目筛，得到黄皮果粉末；

(2).用乙醇浸泡步骤(1)所得的黄皮果粉末，超声提取5次；

(3).过滤，合并滤液，离心，取上清液浓缩，然后再用石油醚萃取3次，每次石油醚萃取后分去上层萃取液，取下层液体挥去石油醚，再用乙酸乙酯萃取5次，分别合并上层乙酸乙酯萃取液和下层提取液，采用减压蒸馏法进行浓缩，得到乙酸乙酯浸膏和下层提取液浸膏；

(4).分别用3-5倍体积的双蒸水稀释所述步骤(3)获得的乙酸乙酯浸膏和下层提取液浸膏，混悬后分别通过大孔树脂柱吸附，采用5-10倍柱体积的适度乙醇进行梯度洗脱，收集并合并所获得洗脱液减压浓缩至无醇味浸膏，即得所述黄皮果提取物。

进一步地，所述步骤(2)中乙醇的浓度为95％，乙醇的用量是9倍黄皮果粉末重量，浸泡时间为12-14h，超声提取时间是每次1.5h。

进一步地，所述步骤(3)中离心的转速为3000rpm/min，离心的时间为10min。

更进一步地，所述步骤(3)中上清液浓缩至相对密度1.20-1.45。