[发明专利]一种高效降解大豆异黄酮的中温中性β-葡萄糖苷酶HiBgl3B及其基因和应用

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种高效降解大豆异黄酮的中温中性β-葡萄糖苷酶HiBgl3B及其基因和应用。

背景技术

β-葡萄糖苷酶(beta-glucosidase,EC 3.2.1.21)是纤维素酶系的一个重要组成部分，特异性地从低聚寡糖链还原端水解下单个葡萄糖残基，是纤维素彻底降解为葡萄糖的关键酶。同时，由于其能够有效地水解纤维二糖，消除产物积累对葡聚糖酶的抑制作用，β-葡萄糖苷酶的水解作用也是纤维素降解过程的限速步骤。

β-葡萄糖苷酶在很多领域都有着广泛的应用。在工业上，随着生物乙醇作为新型安全环保的替代能源受到日益重视，木质纤维素的降解也备受关注，极大地增加了能源工业中对β-葡萄糖苷酶的需求。在食品行业，能够水解含有烷基和芳香基的葡萄糖苷键以及低聚寡糖等，如将食物中的含有芳香环的糖苷类物质水解，释放出具有浓郁香味的芳香族化合物，从而改善食品风味。在饲料和医药保健品行业中，β-葡萄糖苷酶能够高效水解大豆异黄酮等天然糖苷，实现无生物活性的糖苷与有生物活性的苷元之间的生物转化，发挥多种生物学功能。

β-葡萄糖苷酶来源广泛，在植物、动物、微生物中都有发现。现今微生物来源的β-葡萄糖苷酶主要集中于丝状真菌，特别是曲霉属和木霉属，俨然成为工业用β-葡萄糖苷酶的主要来源。本发明的β-葡萄糖苷酶HiBgl3B来源于嗜热真菌特异腐质霉，具有良好的酶学性质，其最大特点在于其独特的底物特异性，其对于pNPG和染料木苷、黄豆苷具有识别能力和水解活性，但对天然底物龙胆二糖、纤维二糖和扁桃苷无活性，具有很好的研究和应用价值。

发明内容

本发明的目的是提供一种高效降解大豆异黄酮的中温中性β-葡萄糖苷酶。

本发明的再一目的是提供编码上述β-葡萄糖苷酶的基因。

本发明的另一目的是提供包含上述基因的重组载体。

本发明的另一目的是提供包含上述基因的重组菌株。

本发明的另一目的是提供一种制备上述β-葡萄糖苷酶的基因工程方法。

本发明的另一目的提供上述β-葡萄糖苷酶的应用。

本发明从腐质霉(Humicola insolens)中分离得到一种新的具有独特底物特异性的中温中性β-葡萄糖苷酶HiBgl3B，并构建了能够高效表达此β-葡萄糖苷酶的重组酵母菌株。

本发明提供了一种中温中性β-葡萄糖苷酶HiBgl3B，其氨基碱序列如SEQ ID NO.1所示。

SEQ ID NO.1：