[发明专利]一种具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法

权利要求书

1.一种具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法，其特征在于：筛选步骤包括：

a、取样：泥水混合样取于青岛胶南市大朱山嘴海域，在低温下带回实验室；

b、富集培养基配制：1000 毫升海水加入：5克NH₄Cl、1-5克CH₃COONa、0.2克MgSO₄·7H₂O、0.2克酵母膏、0.1-0.3 克蛋白胨，调pH到7.0，121℃灭菌30min；

灭菌后加入： 5%的NaHCO₃溶液加20毫升、5%的KH₂PO₄溶液4毫升；

c、富集：在无菌条件下接种10%泥水混合样于含有b所述培养基的锥形瓶中，用不透气橡胶塞密封，28℃±1℃静置培养，光照强度36μE·m^-2·s^-1，光暗比15h:9h，每天摇动混合一次；

培养7天后，取部分富集液按10%转接至新鲜的b培养基中，如上条件中再次富集培养7天；

共转接三次获得最终富集液；

d、分离纯化培养基配制：1000 毫升海水加入0.1克NH₄Cl，0.3 克CH₃COONa，0.02 克MgSO₄·7H₂O，0.1克酵母膏，18克琼脂，pH值7.0, 121℃灭菌30min；

灭菌后加入0.2克 NaHCO₃，0.02 克 K₂HPO₄；

e、分离纯化：在无菌环境下，移取1ml富集液于无菌培养皿中，倾注冷却至50-55℃的d所述培养基，缓慢摇匀，静置凝固；

再倾注一层上层培养基进行密封；

28℃±1℃静置培养，光照强度36μE·m^-2·s^-1，24h光照培养箱中培养，通过观察，挑取红色单菌落，重复在d所述培养基中进行划线分离，获得红假单胞菌属光合细菌。

2.根据权利要求1所述的具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法，其特征在于：所述步骤e中上层培养基为1000ml蒸馏水中加入18克琼脂、18克褐藻酸钠，121℃灭菌30min，冷却至50-55℃使用。

3.根据权利要求1所述的具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法，其特征在于：所述红假单胞菌属光合细菌应用于养殖水体或生活污水中，用量为：养殖水体1.2×10⁷-10⁸CFU/L水体时，48h氨氮降解率为96%，生活污水中10⁸CFU/L-5×10⁷CFU/L水体，72h氨氮降解率为68%。