[发明专利]一种检测过氧化氢的底物预固定布基微流控化学发光方法

权利要求书

1.一种检测过氧化氢的底物预固定布基微流控化学发光方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)制作布基微流控芯片

设计进样区、检测区和微流控通道的图案，然后制成含有该图案的网纱网板；将布片置于网纱网板下方，并在网纱网板上涂蜡；将布与网纱网板一起加热5-10秒；将布从网纱网板上取下并冷却至室温，得到布基微流控芯片；

所采用的布片是灯芯绒全棉布；

(2)化学发光底液预先固定于芯片检测区

将鲁米诺溶液、辣根过氧化物酶溶液、对碘苯酚溶液按体积比1:1:1混合，得到化学发光底液；在检测前，将化学发光底液滴加到芯片检测区，然后在2～8℃下避光晾干储存；

所述鲁米诺溶液的浓度为3×10^-3mol/L，辣根过氧化物酶溶液的浓度为0.8mg/mL；

(3)进样检测

将样品碾碎，用pH值为10的TE缓冲液侵泡10min，静置后所得上清液为样品溶液；在芯片进样区滴加样品溶液，若样品中含有H₂O₂，则化学发光反应被触发，经CCD数字成像设备采集获得发光图像，并通过Matlab和Image J软件对图像进行处理。

2.根据权利要求1所述的检测过氧化氢的底物预固定布基微流控化学发光方法，其特征在于：所述的设计图案是用软件Adobe Illustrate CS5设计。