[发明专利]一种固定红发夫酵母及制备新科思糖的方法及应用

权利要求书

1.一种固定红发夫酵母及制备新科思糖的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)红发夫酵母菌悬液的制备：用生理盐水将红发夫酵母菌体分散均匀，得到红发夫酵母菌悬液；

(2)固定化细胞的制备：将步骤(1)制备的红发夫酵母菌悬液与海藻酸钠溶液混匀，再滴加到氯化钙溶液中静置钙化，固液分离，洗涤固体，接着将固体转到壳聚糖溶液中覆膜，洗涤，得到固定化细胞；

(3)固定化细胞的转化：取步骤(2)所得的固定化细胞置于摇瓶或反应器中进行转化，得到新科思糖；

步骤(1)中所述的红发夫酵母菌悬液对应的干菌体浓度为40mg/mL；

步骤(2)中所述的海藻酸钠溶液的浓度为质量体积比3％；

步骤(2)中所述的氯化钙溶液为0.2mol/L、pH＝6的氯化钙溶液；

步骤(2)中所述的壳聚糖溶液的浓度为质量体积比1％；

所述的红发夫酵母菌悬液和所述的海藻酸钠溶液按体积比1：2配比；

所述的红发夫酵母菌悬液和所述的氯化钙溶液按体积比1：30配比；

所述的红发夫酵母菌悬液和所述的壳聚糖溶液按体积比1：15配比；

步骤(2)中所述的钙化的时间为30min；

步骤(2)中所述的覆膜的时间为15min。

2.根据权利要求1所述固定红发夫酵母及制备新科思糖的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的红发夫酵母菌体通过如下步骤制备得到：将活化后的红发夫酵母菌液以体积百分比10％的接种量接种于发酵培养基中，于18～24℃、180～220rpm培养32～48h，离心，洗涤，离心，得到红发夫酵母菌体；

所述的发酵培养基组成如下：木糖10g/L，酵母浸粉10g/L，麦芽汁22g/L。

3.根据权利要求1所述固定红发夫酵母及制备新科思糖的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的红发夫酵母为红发夫酵母As 2.1557或红发夫酵母ATCC 66270。

4.根据权利要求1所述固定红发夫酵母及制备新科思糖的方法，其特征在于：

步骤(3)中所述的摇瓶的转化条件为蔗糖溶液浓度：200g/L～600g/L，反应温度20～50℃。

5.根据权利要求4所述固定红发夫酵母及制备新科思糖的方法，其特征在于：所述的摇瓶的转化条件为蔗糖溶液浓度400g/L～500g/L、反应温度20～30℃。

6.根据权利要求1所述固定红发夫酵母及制备新科思糖的方法，其特征在于：步骤(3)中所述的反应器为层析柱。

7.根据权利要求6所述固定红发夫酵母及制备新科思糖的方法，其特征在于：所述的层析柱的尺寸为：φ1.5×20cm；

所述的反应器中的固定化细胞的填充高度为15～17cm。

8.根据权利要求1所述固定红发夫酵母及制备新科思糖的方法，其特征在于：所述的反应器的转化条件为蔗糖溶液浓度：400g/L、蔗糖溶液的停留时间为1.1～3.3h。

9.权利要求1～8任一项所述固定红发夫酵母及制备新科思糖的方法在工业化生产新科思糖中的应用。