[发明专利]卡那霉素适配体亲和柱的制备方法有效
| 申请号： | 201410724019.0 | 申请日： | 2014-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN104383718A | 公开（公告）日： | 2015-03-04 |
| 发明（设计）人： | 廖且根;罗林广;胡丽芳;王冬根 | 申请（专利权）人： | 江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所 |
| 主分类号： | B01D15/38 | 分类号： | B01D15/38;B01J20/281;G01N1/34 |
| 代理公司： | 江西省专利事务所 36100 | 代理人： | 胡里程 |
| 地址： | 330200 江*** | 国省代码： | 江西;36 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 卡那霉素 适配体 亲和 制备 方法 | ||
1.一种卡那霉素适配体亲和柱的制备方法，其步骤：（1） 活化：取60mg的环氧活化琼脂糖微球FF在2.0mL去离子水中悬浮溶胀成凝胶1小时，用60mL去离子水分三次洗涤凝胶，静置5min后，移除清洗液；（2） 偶联：将氨基修饰的卡那霉素适配体溶于1mL20.0mmol/LpH10.0的磷酸盐缓冲液中，将步骤（1）溶胀凝胶悬浮于含适配体的缓冲液中，在37℃的水浴中振摇16小时，反应完后，再用3mL去离子水洗涤未反应的适配体，静置5min后，移除清洗液；（3） 封闭：将步骤（2）凝胶悬浮到2mL1mol/LpH8.0乙醇胺溶液中，在50℃的水浴中振摇4小时，反应完后，用3mL含0.5mol/LNaCl的0.1mol/LpH4.0乙酸缓冲液和3mL含0.5mol/LNaCl的pH8.3偶联缓冲液交替清洗，每次清洗2min，至少循环3次；（4） 装柱：将步骤（3）的悬浮凝胶液移入固相萃取小柱，避免产生气泡，用5mL0.1mol/LpH8.0磷酸盐缓冲液平衡小柱。
2.根据权利要求1所述卡那霉素适配体亲和柱的制备方法，其特征在于：其中步骤（2）中氨基修饰的卡那霉素适配体为DNA合成公司商品化生产， 卡那霉素适配体的序列为：5'- TGG GGG TTG AGG CTA AGC CGA TTT TTT -NH2-3'。
3.根据权利要求1所述卡那霉素适配体亲和柱的制备方法，其特征在于：本发明卡那霉素适配体亲和柱的应用方法，按下述步骤进行：（a）上样：放掉柱内溶液，将提取的样品用0.1mol/LpH8.0磷酸盐缓冲液溶解或稀释，上样，上样时流速不超过1mL/min，避免样品流干；（b）淋洗：待样品过柱后，用3 mL去离子水淋洗柱床、弃去；（c）洗脱：用3mL甲醇洗脱，在50℃下氮气吹干，用流动相定容待测；（d）再生：对于使用之后的凝胶，以2~3倍柱体积的含0.5mol/LNaCl的0.1mol/LpH8.3Tris-HCl和含0.5mol/LNaCl的0.1mol/pH4.5乙酸缓冲液交替冲洗2~3次。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所，未经江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201410724019.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：表层过滤技术
- 下一篇：用于周围神经缺损的羧甲基几丁质复合神经导管的制备
