[发明专利]一种石上柏多糖提取物制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属于药理学领域，具体涉及一种石上柏多糖提取物制备方法及其应用。

背景技术

石上柏( Selaginella doederleinii Hieron)是常用中药材，为蕨类植物门（Pteridophyta）卷柏科（Selaginellaceae）卷柏属（Selaginella）植物的干燥全草。其又名深绿卷柏、大叶菜、水柏枝等，主产于云南、贵州、广西、浙江、福建、台湾等地，其性味甘、微苦、涩、凉。在传统中药中，共有六个卷柏属植物有收入典籍，其中石上柏是常用于治疗肿瘤的药材之一。传统中医认为石上柏具有“扶正祛邪”的双重作用，以复方或单方用于肿瘤的治疗历史悠久。到近代，石上柏的单方制剂中成药石上柏片（石上柏醇提物为主要成分）已经用于咽喉癌、绒毛膜上皮癌、肺癌及消化道癌症的治疗，具有较好的抗癌作用。

现代化学药理研究表明，石上柏主要含有多糖类，黄酮类，生物碱类等活性物质，其中多糖类成分具有较好的体外抑制肿瘤，增强或恢复免疫功能等作用。目前石上柏多糖的研究少见文献及专利报道。而且，市面上也未见关于石上柏多糖的药物或药物组合物的出现。

发明内容

本发明的目的在于提供一种石上柏多糖提取物制备方法及其应用，本发明的再一目的是提供一种含有以上石上柏多糖提取物的药物。还提供了含有该石上柏多糖提取物的制剂及该提取物的用途。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的石上柏多糖提取物中主要含有多糖。其中，以重量百分比计，多糖的含量为90%以上，优选的，多糖的含量为95%-98%。

本发明所述石上柏多糖的制备方法，包括以下步骤：（1）脱脂：取石上柏干燥全草，用4-10倍量有机溶剂浸泡后回流1-3次，过滤，挥干有机溶剂得药渣；（2）提取：上述药渣加水浸泡后，水浴提取1-3次，每次1-3小时，过滤，浓缩滤液至每ml相当于含生药0.5-2.0g；（3）醇沉：向上述浓缩液中加入3-8倍体积乙醇，冰浴放置，过滤，沉淀冷冻干燥后得多糖提取物粗品Ⅰ；（4）除蛋白：将上述多糖提取物粗品Ⅰ溶于水中配制成0.01-0.1g/ml的粗品Ⅰ溶液，加入1－4倍体积氯仿－正丁醇（V/V= 4:1）混合溶液，搅拌后分层，上层重复操作4-8次后，加入3-8倍体积乙醇，冰浴放置，过滤，沉淀冷冻干燥，得多糖提取物粗品Ⅱ；（5）除单糖及寡糖：将上述多糖提取物粗品Ⅱ溶于水中配制成0.01-0.1g/ml的粗品Ⅱ溶液，用截止分子量：8000-14000的透析膜透析2天后，取出透析袋内液体加入3-8倍体积乙醇，冰浴放置，过滤，沉淀冷冻干燥后得多糖提取物粗品Ⅲ；（6）凝胶柱纯化：将上述多糖提取物粗品Ⅲ用凝胶色谱柱纯化，用硫酸苯酚法跟踪馏分，收集主峰合并后，加入3-8倍体积乙醇，冰浴放置，过滤，沉淀冷冻干燥，得黄棕色石上柏多糖提取物。

所述步骤（1）中的有机溶剂为石油醚、乙酸乙酯、乙醇或95％乙醇水溶液中的一种。

所述步骤（2）中加水量为4-10倍量；提取温度为20-90℃。

所述步骤（3）-（6）中，加入乙醇后乙醇含量为50%-80%。

所述步骤（4）-（6）中，冰浴放置12-36小时。

本发明所述石上柏多糖提取物可以作为活性成分，加入药剂学上可以接受的辅料，按照药剂学上记载的制剂的制备方法制成制剂。

本发明所述石上柏多糖提取物还可以作为活性成分之一，加入药剂学上接受的辅料，按照药剂学上记载的制剂的制备方法制成制剂。

本发明的石上柏多糖提取物及其制剂可在制备治疗和预防癌症药物中应用。

本发明的优点在于：石上柏为民间抗癌草药，广泛分布于我国南方地区，资源丰富。石上柏多糖的研究少见文献及专利报道。本发明首次提供一种石上柏多糖提取物制备方法及其制剂制备方法，可为医疗领域新增一种廉价、药效显著的新型多糖类抗肿瘤药物。

具体实施方式

下面将结合实施例进一步说明本发明的实质内容和有益效果，该实施例仅用于说明本发明而非对本发明的限制。

实施例一 石上柏多糖提取物的制备