[发明专利]一种同时快速测定葡萄糖、果糖和总糖含量试剂盒及应用有效
申请号: | 201410725916.3 | 申请日: | 2014-12-04 |
公开(公告)号: | CN104360012A | 公开(公告)日: | 2015-02-18 |
发明(设计)人: | 史培颖;姚宏;缪晓青 | 申请(专利权)人: | 福建农林大学 |
主分类号: | G01N31/22 | 分类号: | G01N31/22;G01N21/31 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350002 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 快速 测定 葡萄糖 果糖 含量 试剂盒 应用 | ||
1. 一种同时快速测定葡萄糖、果糖和总糖含量的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括试剂I、试剂Ⅱ、试剂Ⅲ和试剂Ⅳ;试剂I为葡萄糖、果糖和蔗糖标准品的混合溶液;试剂Ⅱ为邻甲苯胺试剂,用于测定葡萄糖含量;试剂Ⅲ为间苯二酚试剂,用于测定果糖含量;试剂Ⅳ为苯酚试剂,用于测定总糖含量。
2. 根据权利要求1所述同时快速测定葡萄糖、果糖和总糖含量的试剂盒,其特征在于:试剂I是将葡萄糖、果糖和蔗糖标准品各0.01~10g,于临用时加蒸馏水溶解并定容至100mL;试剂Ⅱ是将硫脲0.1~1g溶于75mL冰醋酸中,再加入邻甲苯胺1~30mL、饱和硼酸4mL,混匀后加冰醋酸至100mL,置棕色瓶中保存;试剂Ⅲ是将0.1~2 g间苯二酚溶于100mL盐酸溶液中,所用盐酸溶液是将水和浓盐酸按体积比2:1配制而成;试剂Ⅳ是将0.1~10g苯酚加蒸馏水定容至50mL。
3. 一种如权利要求1所述同时快速测定葡萄糖、果糖和总糖含量试剂盒的应用方法,其特征在于:用于蜂蜜中葡萄糖、果糖和总糖含量的测定。
4. 根据权利要求3所述同时快速测定葡萄糖、果糖和总糖含量试剂盒的应用方法,其特征在于:包括如下步骤:
1)取微孔板,于前三排的1~5号孔中依次加入体积递减的试剂I,用于绘制葡萄糖、果糖及总糖的标准曲线,1号孔中试剂I的体积为10~200 μL,另于前三排的6~8号孔中加入10~200 μL的水作为空白对照;
2)其余微孔以每3排3列为1个测定单元,每排依次加入体积递减的蜂蜜样品溶液;
3)在装有试剂或样品溶液的微孔中,每三排按顺序分别加入5~150μL试剂Ⅱ、5~150μL试剂Ⅲ、5~150μL试剂Ⅳ+5~150μL浓硫酸;
4)将微孔板加盖后于60-95℃下水浴5~60分钟后,用酶标仪或紫外-可见分光光度计分别于630nm、480nm和490nm处测定各孔的吸光度值;
5)将样品溶液的吸光度值分别代入所得到的标准曲线中,计算出样品溶液中葡萄糖、果糖及总糖的含量。
5. 根据权利要求4所述同时快速测定葡萄糖、果糖和总糖含量试剂盒的应用方法,其特征在于:所述微孔板为96孔或384孔;
所述蜂蜜样品溶液的浓度为10mg/mL。
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