[发明专利]一种高磷酸化卵清蛋白的微波快速制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及高磷酸化蛋白的制备方法，属于食品加工领域。

背景技术

蛋白质的性质如物理、化学和功能性质主要依赖于它们的蛋白质组成，即蛋白质氨基酸残基侧链的结构，因此可以通过修饰蛋白质氨基酸残基侧链结构来改善蛋白质的功能性质。蛋白质磷酸化是原核和真核生物中最重要的调控修饰形式，是真核细胞中信号传导最主要的方式，在对外界刺激信号传递和应答过程中起着重要的作用，几乎所有的生理和病理过程，包括细胞增殖、发育和分化，肌肉收缩、神经活动和新陈代谢等都与蛋白质的磷酸化有关。蛋白质通过磷酸化修饰，可在蛋白质氨基酸侧链加入一个带有强负电的磷酸根基团，发生酯化作用，增加蛋白的电负性，使蛋白分子容易分散，从而改变蛋白质的构型、活性及与其他分子相互作用的能力。蛋白质磷酸化程度受很多因素的影响，如加热。

近年来，微波因其高效、节能、整体作用等优势而被广泛应用于食品、化工、医药等领域，尤其在食品的加热、焙烤和杀菌消毒等方面。与传统加热相比，它能够有效改进工艺，增强选择性，执行反应。目前，微波技术在食品工业中的应用如微波干燥、杀虫、解冻、灭酶灭菌等工艺早已成熟。

发明内容

本发明工艺步骤如下：

（1）蛋白溶液的配制：将25 g卵清蛋白溶解于500 mL蒸馏水中，配制成浓度为5%的溶液；

（2）磷酸化修饰：于上述溶液中加入25 g焦磷酸钠，慢慢搅拌30 min至完全溶解并混合均匀；

（3）微波处理：将磷酸化修饰的蛋白混合液取200 mL放置于800 mL高压密封罐中，采用微波加热，控制微波功率为560-700 W，时间为8-13 min；

（4）透析：将微波完成的溶液迅速冷却至室温后，置于流动的蒸馏水中进行透析，透析袋的截留分子量为3500，透析时间为24 h；

（5）冷冻干燥：样品置于-80 ℃冰箱中预冻5 h后，于冷冻干燥机冷冻24 h后即得高磷酸化卵清蛋白粉；

（6）真空包装，成品；

（7）产品检测：检测产品磷酸化程度。

本发明与现有技术对比的优点是：本发明使用的是家用式微波炉，操作简单，快速，成本低。使用高压密封罐进行微波，一方面溶液可以在几分钟内快速升温至120℃以上，另一方面，可以减少溶液蒸发所造成的损失。本发明所得卵清蛋白磷酸化程度高，是未处理蛋白的5-8倍。

具体实施方式

为了更好地理解本发明，下面结合具体实施例来进一步说明。

实施例1：

（1）蛋白溶液的配制：将25 g卵清蛋白溶解于500 mL蒸馏水中，配制成浓度为5%（w/v）的溶液；

（2）磷酸化修饰：于上述溶液中加入25 g焦磷酸钠，慢慢搅拌30 min至完全溶解并混合均匀；

（3）微波处理：将磷酸化修饰的蛋白混合液取200 mL放置于800 mL高压密封罐中，采用微波加热，控制微波功率为560 W，时间为13 min；

（4）透析：将微波完成的溶液迅速冷却至室温后，置于流动的蒸馏水中进行透析，透析袋的截留分子量为3500，透析时间为24 h；

（5）冷冻干燥：样品置于-80 ℃冰箱中预冻5 h后，于冷冻干燥机冷冻24 h后即得高磷酸化卵清蛋白粉；

（6）真空包装，成品；

（7）产品检测：检测产品磷酸化程度。

实施例2：

（1）蛋白溶液的配制：将25 g卵清蛋白溶解于500 mL蒸馏水中，配制成浓度为5%（w/v）的溶液；

（2）磷酸化修饰：于上述溶液中加入25 g焦磷酸钠，慢慢搅拌30 min至完全溶解并混合均匀；

（3）微波处理：将磷酸化修饰的蛋白混合液取200 mL放置于800 mL高压密封罐中，采用微波加热，控制微波功率为600 W，时间为10 min；

（4）透析：将微波完成的溶液迅速冷却至室温后，置于流动的蒸馏水中进行透析，透析袋的截留分子量为3500，透析时间为24 h；

（5）冷冻干燥：样品置于-80 ℃冰箱中预冻5 h后，于冷冻干燥机冷冻24 h后即得高磷酸化卵清蛋白粉；

（6）真空包装，成品；

（7）产品检测：检测产品磷酸化程度。

实施例3：

（1）蛋白溶液的配制：将25 g卵清蛋白溶解于500 mL蒸馏水中，配制成浓度为5%（w/v）的溶液；