[发明专利]琼脂糖在PCR扩增中的应用、PCR扩增试剂盒及PCR扩增方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及琼脂糖在PCR扩增中的应用、PCR 扩增试剂盒及PCR扩增方法。

背景技术

PCR是聚合酶链式反应的简称，是一种用于放大扩增特定的DNA片段 的分子生物学技术，其研究对生物学各个领域有着深刻的影响，与医、农业、 生物工程等的关系十分密切，例如PCR技术涉及在农业上育种的新途径， 涉及在医学上检测、治疗遗传疾病，涉及以基因工程为基础的新兴工业，涉 及法医物证鉴定、亲子鉴定等。

然而，对于极其微量DNA样本，由于PCR扩增反应敏感度低，很难捕 捉到有效的DNA信息。对于微量的DNA样本，常规的PCR扩增方法的反 应敏感度低是导致后续PCR扩增效果差的主要原因。例如，在法医侦检工 作中，犯罪现场的法医学物证的鉴定和检出，对于及时有效地指证犯罪分子， 打击犯罪起到至关重要的作用。犯罪现场中指纹、烟蒂、指甲等都含有微量 的DNA信息，可为找出或指证犯罪嫌疑人提供科学依据。但由于犯罪现场 的DNA残留甚微，采集到的痕迹法医物证DNA极其微量，常规PCR扩增 方法的反应敏感度低，难以捕捉到有效DNA信息从而扩增效果较差，直接 导致后续的DNA检出率低，STR分型失败，不能指认犯罪个体。

因此，如何提高PCR扩增的反应敏感度，从而提高微量DNA的PCR 扩增效果，对最终获得完整STR分型结果具有重要意义。

发明内容

有鉴于此，本发明有必要提供一种能提高PCR扩增的反应敏感度，从 而提高微量DNA的PCR扩增效果的琼脂糖在PCR扩增中的应用、PCR扩 增试剂盒及PCR扩增方法。

一种琼脂糖在PCR扩增中的应用，在配置PCR扩增体系过程中加入琼 脂糖。

一种PCR扩增试剂盒，包括盒体及盒体中单独存放的试剂，所述试剂 包括琼脂糖。

一种PCR扩增方法，所述方法包括在配置PCR扩增体系过程中加入琼 脂糖的步骤。

本发明提供的琼脂糖在PCR扩增中的应用、PCR扩增试剂盒及PCR扩 增方法的有益效果是：在配置PCR扩增体系过程中加入琼脂糖，由于琼脂 糖对DNA具有极强的吸附力，并提高反应体系的沸点使体系缓冲液不易蒸 发，同时琼脂糖流体是由许多微小球体组成，可以包裹反应体系，使整个 PCR扩增反应在一个微小空间完成，从而提高PCR扩增的反应敏感度，使 反应更加充分，提高微量DNA的PCR扩增效果，最终获得完整STR分型 结果。

附图说明

图1是实验组一的STR图谱，即采用常规的STR荧光检测试剂盒在 10μlPCR扩增反应体系下对志愿者一使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞 DNA进行PCR扩增后的STR分型结果。

图2是实验组二的STR图谱，即采用本发明实施方式提供的添加了琼脂 糖的PCR扩增试剂盒在10μlPCR扩增反应体系下对志愿者一使用过的牙刷 上提取的口腔脱落细胞DNA进行PCR扩增后的STR分型结果。

图3是实验组三的STR图谱，即采用常规的STR荧光检测试剂盒在 10μlPCR扩增反应体系下对志愿者二使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞 DNA进行PCR扩增后的STR分型结果。

图4是实验组四的STR图谱，即采用常规的STR荧光检测试剂盒在5μl PCR扩增反应体系下对志愿者二使用过的牙刷上提取的口腔脱落细胞DNA 进行PCR扩增后的STR分型结果。

图5是实验组五的STR图谱，即采用本发明实施方式提供的添加了琼脂 糖的PCR扩增试剂盒在5μlPCR扩增反应体系下对志愿者二使用过的牙刷 上提取的口腔脱落细胞DNA进行PCR扩增后的STR分型结果。

图6是采用本发明实施方式提供的添加了琼脂糖的PCR扩增试剂盒在 3μlPCR扩增反应体系下进行PCR扩增后的STR分型结果示例1。

图7是采用本发明实施方式提供的添加了琼脂糖的PCR扩增试剂盒在 3μlPCR扩增反应体系下进行PCR扩增后的STR分型结果示例2。

具体实施方式

本发明提供了一种琼脂糖在PCR扩增中的应用。琼脂糖在生物学领域 主要用于PCR扩增后的产物检测阶段进行琼脂糖凝胶电泳，并未用于PCR 扩增阶段。

本发明提供的琼脂糖在PCR扩增中的应用，为在配置PCR扩增体系过 程中加入琼脂糖。