[发明专利]一种高效降解蝇蛆蛋白的苏云金芽孢杆菌菌株在审

专利信息
申请号: 201410729336.1 申请日: 2014-12-04
公开(公告)号: CN104450571A 公开(公告)日: 2015-03-25
发明(设计)人: 李立恒;方俊;符晨星;谢文玉 申请(专利权)人: 湖南农业大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;A23K1/00;A23K1/16;C12R1/07
代理公司: 湖南兆弘专利事务所 43008 代理人: 江巨鳌
地址: 410128 *** 国省代码: 湖南;43
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摘要:
搜索关键词: 一种 高效 降解 蛋白 苏云金 芽孢 杆菌 菌株
【说明书】:

技术领域

发明涉及一种蝇蛆蛋白高效降解菌,属于农业微生物技术领域,是利用微生物发酵的方法降解蝇蛆蛋白,适用于优质蛋白饲料的生产。

背景技术

近年来,随着我国饲料工业的迅猛发展,蛋白质饲料的原料短缺问题已严重地限制了我国饲料工业的发展。目前,我国主要靠进口鱼粉以解决蛋白质资源的不足的问题,所以开发新的蛋白质资源成为科学研究的热点课题。大豆是优质的蛋白原料,但其偏高的价格无疑将限制饲料工业的发展。因此,尽快开发、寻求与推广新型的、安全的蛋白饲料原料是当前的首要任务。家蝇是全世界各地区最为常见的一种昆虫,其数量巨,繁殖能力强,繁殖速度快。蝇蛆是家蝇的幼虫形态,含有多种脂肪酸、氨基酸、维生素与矿物质。在我国蝇蛆可以进行繁殖,具有较高的蛋白质含量,是可以进行开发的。目前已制成了蝇蛆蛋白粉。蝇蛆中蛋白质含量约为60.53%,氨基酸种类齐全,且含人体所需的8种必需氨基酸以及组氨酸,其必需氨基酸含量占氨基酸总量的42.14%,完全超过了FAO/WHO建议的优良蛋白质必需氨基酸应占氨基酸总量40%的标准。蝇蛆蛋白与其它优质动物蛋白相比较毫不逊色,其营养价值甚至还要高于其它的动物蛋白,因此它更是一种优质的蛋白资源。但蝇蛆蛋白如果直接饲喂,却存在蝇蛆蛋白营养利用低下的问题,而蝇蛆蛋白质在水解出寡肽,多肽和氨基酸的混合物后,能提高饲料的营养价值,有利于动物的吸收;当然可以采用酶法进行降解,但成本高,而且所购蛋白酶活力低,水解程度小,如果采用蝇蛆蛋白降解菌株,既可节约成本,又能提高水解程度。目前国内研究较少,是蝇蛆蛋白饲料的发展方向。

发明内容

本发明的目的是提供一种蝇蛆蛋白高效降解菌株,用于蝇蛆蛋白的降解,从而开发一种新的有用的蛋白质资源,解决目前蝇蛆蛋白营养利用低下的问题。

本发明提供一种高效降解蝇蛆蛋白的苏云金芽孢杆菌菌株,菌株分类命名为血清变异型苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis serovar thuringiensis),2014年10月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏号为CGMCC NO.9789。主要生物学特性为,菌落形态为圆形,乳白色,表面湿润,为典型的细菌形态,经革兰氏染色染色法和芽孢染色法鉴定,该菌株为革兰氏阴性芽孢杆菌。经基因测序鉴定为血清变异型性苏云金芽孢杆菌。该菌株Sep-7S ribosomal RNA gene登录号为KF228911。

蝇蛆蛋白降解菌株能在蝇蛆蛋白粉培养基上生长产生透明水解圈,其培养基配方为:100mL蒸馏水中含2.0g蝇蛆蛋白粉,0.5g氯化钠,2.0g琼脂粉,加热溶解,调节PH值7.0,121℃高压灭菌30min。所述的蝇蛆蛋白粉是将蝇蛆烘干后,进行粉碎而成,过100目筛。

上述菌株KF228911的扩大培养方法为:

(1)种子培养基的配方为:1L蒸馏水中含:3g牛肉膏,10g蛋白胨,5g氯化钠,加热溶解,调节PH值7.0,121℃高压灭菌30min。

(2)将所述的菌株KF228911接种于装有100mL种子培养基的250mL的锥形瓶中,温度30℃条件下,在摇床上以150r/min的转速培养24小时,获得菌悬液,菌液数量为4×1010CFU/ml。

蝇蛆蛋白降解菌发酵培养基配方为:1L蒸馏水中含:20g蝇蛆蛋白粉,20g葡萄糖,5g氯化钠,调节PH值7.0,121℃高压灭菌30min。

用蝇蛆蛋白降解菌KF228911菌悬液以5%的接种量进行接种,在发酵后,可以对蝇蛆蛋白进行降解,培养温度30℃,150r/min培养48小时,在完成培养后对发酵液4000r/min进行离心20分钟,收集上清液,可产生可溶性氨基酸含量为1.744mg/mL。

有益效果

本发明提供了高效降解蝇蛆蛋白的苏云金芽孢杆菌菌株KF228911。蝇蛆蛋白降解菌能在蝇蛆蛋白粉培养基上生长,产生透明水解圈。提供了蝇蛆蛋白降解菌KF228911的扩大培养方法。用蝇蛆蛋白降解菌株培养蝇蛆蛋白发酵培养基,发酵液中蝇蛆蛋白降解产生的氨基酸含量为1.744mg/mL。蝇蛆蛋白饲料如接种蝇蛆蛋白降解菌KF228911可提高其可溶性氨基酸的含量,提高蝇蛆蛋白作为饲料的营养价值,具有广阔的发展前景。

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