[发明专利]一种中温α-淀粉酶

权利要求书

1.一种中温α-淀粉酶，其特征在于，所述中温α-淀粉酶具有以下特性：

(1)该酶最适作用温度为65℃，该酶在65℃条件下保存24h仍具有80％酶活，70℃条件下保存12h仍具有50％以上酶活；

(2)该酶最适反应pH值为5.0，在pH4-6下保存18h后仍有80％以上的酶活；

(3)该酶酶活力为7000-8500U/ml。

2.如权利要求1所述的一种中温α-淀粉酶，其特征在于，该酶由枯草芽孢杆菌304Bacillus subtilis304生产所得，保藏号为CCTCC NO:M 2013600。

3.如权利要求1或2所述的一种中温α-淀粉酶，其特征在于，由以下方法制得：

(1)枯草芽孢杆菌304菌种活化，三级种子培养和种子罐培养；

(2)发酵罐发酵

将步骤(1)中一级种子罐将种子液以将种子液以6-10％接种量接入发酵罐，培养温度30-37℃，搅拌速度200-250r/min，通风量(V/V)1:1-3,培养时间60-85h；

(3)发酵液经过滤、浓缩、调配、精滤、干燥得中温α-淀粉酶。

4.如权利要求3所述的一种中温α-淀粉酶，其特征在于，所述种子培养，其培养基重量组成为：酵母粉0.3-0.5％，葡萄糖1-1.5％，蛋白胨0.3-0.5％，牛肉膏0.5-0.8％，磷酸氢二钾0.8-1.5％，中草药剂粉1.5-2％，海藻糖1-3％，硫酸钙1g,氯化镁2g,柠檬酸钠1-3g，不足部分纯净水补足，pH值5.5-6.5，121-123℃灭菌30-40min。

5.如权利要求3所述的一种中温α-淀粉酶，其特征在于，所述种子罐培养，其培养基重量组成为：麦芽糊精5-15％，酵母粉0.4-0.8％，中草药剂粉1.5-2％，海藻糖1-3％，蛋白胨0.1-0.5％，玉米浆0.1-0.5％，磷酸氢二钾0.8-1.5％，硫酸镁0.05-0.1％，柠檬酸钠0.1-0.5％，不足部分纯净水补足，pH值5.5-6.5，121-123℃灭菌30-40min。

6.如权利要求3所述的一种中温α-淀粉酶，其特征在于，所述发酵培养，其培养基组成为：麦芽糊精50-150g，玉米粉50-60g，豆饼粉15-25g，中草药剂粉30-50g，海藻糖30-40g，酵母粉4-8g，玉米浆1-5g，硫酸铵1-3g，磷酸氢二钾1-2g，磷酸二氢钾1-2g，柠檬酸钠1-5g，消泡剂0.1-1g,纯净水l000mL，pH值5.5-6.5，121℃灭菌20min。

7.如权利要求4-6任意一项所述的一种中温α-淀粉酶，其特征在于，所述中草药粉剂的制备方法如下：

称取黄芪20-30份；党参10-18份；柴胡10-15份；黄芩10-15份；分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下，然后于容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水，控制温度到30-35℃，pH值6-7，按质量比添加0.2-0.35％纤维素酶酶解1-2小时，控制温度70℃～90℃保持5-10分钟，然后降温至45-60℃，pH为5.0-7.0，按重量比分别加入0.12-0.25％的木瓜蛋白酶和果胶酶酶解40-60分钟，冷却到5-10℃保持1.5-2小时，升高温度到85-95℃保持10-25分钟，最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，控制温度至60℃～78℃保持3～4h，过滤；滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药粉剂；

所述乙醇和丙醇的质量比例为1：1-1.5。

8.如权利要求1或2所述的一种中温α-淀粉酶在淀粉酶解工业中的应用。