[发明专利]龙眼果核多酚提取纯化方法及其在制备多酚美白化妆品中的应用

说明书

技术领域：

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种龙眼果核多酚提取纯化方法及其在制备多酚美白化妆品中的应用。

背景技术：

龙眼(Dimocarpus longan Lour.)是无患子科(Sapindaceae)龙眼属(Dimocarpus Lour.)常绿果树。作为经济作物在许多国家如中国、泰国、印度和越南等都有种植。我国分布于福建、台湾、广西、广东、海南、四川、贵州、云南等省区，在福建、广东、广西有大面积的种植。龙眼俗名桂圆，又名龙目、比目、荔枝奴、益智、亚荔枝、圆眼、川弹子、骊珠、燕卵、蜜脾、鲛泪、木弹、绣木团等，是我国南方著名水果，其果肉为乳白或淡白色，肉质带脆，清甜。龙眼作为滋补保健食品，已有一千多年的历史。传统中医学认为，龙眼肉可用于治疗虚劳羸弱、失眠、健忘、惊悸、怔忡，益心脾，补气血，安神。

我国是龙眼的原产国和生产国，种植面积和产量分别占世界的70％和50％以上，是最大的龙眼生产国。近10年来，总产量大幅度增长，由1997年的36.53万吨增加到2006年的110.65万吨，增幅达202.90％，其中2006年广东47.56万吨，广西38.57万吨，福建21.28万吨。由于上市比较集中，贮运条件落后及储藏保鲜技术不足，只有部分龙眼作为水果直接消费，大量的龙眼用于加工桂圆肉、龙眼糖水罐头和龙眼膏等，而剩余的果核都是作为废物直接丢弃。龙眼果核有止血、定痛、理气、化湿的功效，治创伤出血、疝气、疥癣、湿疮和瘰疬。最近报道果核提取物具有抗氧化、降血糖、抗疲劳和抑制直肠癌细胞增生等活性。已确定的龙眼果核成分除了营养成分主要就是多酚，Soong和Barlow利用HPLC-ESI-MS联用技术确定了龙眼果核中含有柯里拉京等十三种多酚，王志远利用同样方法确定了十七种多酚，吴妮妮从中分得没食子酸乙酯等四种化合物。Zheng G.等从龙眼果核分离得到没食子酸、柯里拉京、鞣花酸、没食子酸乙酯、1-O-没食子酰基-β-D-葡萄吡喃糖、短叶苏木酚酸甲酯、短叶苏木酚和鼠李糖基鞣花酸，并测定了它们的清除自由基能力，结果表明活性很强。

文献报道植物多酚具有多种生物学活性，如抗氧化、抗菌、抗病毒、抗炎症、抗动脉硬化、抗诱变、抗肿瘤等，并且对多种酶有抑制作用。植物的果实中含有多种酚类化合物，这些化合物可以保护其免受氧化损伤，抑制酵母、真菌、病毒和细菌的生长。为了综合开发利用龙眼果核，研究它的多酚提取、纯化以及纯化后的多酚的抑制酪氨酸酶的作用，并将纯化的多酚复配于化妆品产品。

对于龙眼果核多酚的提取条件有文献报道。如文献报道(王志远等)的优化条件是：丙酮浓度50％(v/v)，料液比l：140(g/mL)，浸提温度50℃，浸提时间2h，超声20min，浸提三次，龙眼核多酚得率为62.1mg/g(PB法)。文献报道(吴兰兰等)的优化条件是：提取时间106min，乙醇体积分数为58％，提取温度64℃，料液比为1∶9，在此条件下，多酚得率为42.690mg/g(福林酚法)。文献(黄儒强)的方法是以3～10倍的80～95％(体积分数)乙醇在50～90℃回流提取3～6h，乙酸乙酯萃取提取液，萃取液上硅胶柱，以石油醚-氯仿梯度洗脱，真空浓缩、微波干燥的多酚粉末。文献(李清彪等)的方法是以pH9～11的磷酸盐缓冲液60～80℃浸提10～40min，过滤，浓缩滤液，盐酸酸化沉淀，真空干燥沉淀得到产品。

发明内容：

本发明的第一个目的是提供一种龙眼果核多酚提取纯化方法。

本发明的龙眼果核多酚提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)、提取：先将龙眼果核粉末与无水丙酮按照质量体积比(g/mL)为1:10～15混合室温搅拌1～2h，静置后弃上层液，然后按照龙眼果核粉末与提取剂质量体积比为1:10～15第二次加入50～70％的丙酮水溶液，室温搅拌4～6h，静置，倾出上层液并过滤，再按照龙眼果核粉末与提取剂质量体积比为1:10～15第三次加入50～70％的丙酮水溶液，室温搅拌4～6h，静置，倾出提取液过滤，合并第二、三次的滤液，回收丙酮后得到多酚；

(2)、纯化：大孔吸附树脂与步骤(1)中的龙眼果核粉末按照干重重量比为0.7：1，对大孔吸附树脂进行预处理，然后将步骤(1)所得到的多酚加水稀释至浓度为4～6g/L后上柱，用体积分数为40～80％的乙醇进行洗脱，真空浓缩至干得到纯化的多酚。

优选，步骤(1)中龙眼果核粉末，其制备方法为：将龙眼果核自然晒干，粉碎过20目筛即得到龙眼果核粉末。

步骤(1)中所述的回收丙酮，优选为常压旋转蒸发回收丙酮。