[发明专利]一种定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素O、C反应蛋白的检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及生物检测领域，特别是涉及一种定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素O、C反应蛋白的检测试剂盒及其制备方法和用途。

背景技术

类风湿因子(rheumatoid factor,RF)可分为IgM、IgA、IgG、IgD、IgE五型(注：在临床内科学中描述为四型，没有IgD型；但在实验室诊断学中描述为5型)，是类风湿关节炎血清中针对IgG FC片段上抗原表位的一类自身抗体，类风湿因子阳性患者较多伴有关节外表现，如皮下结节及血管炎等。IgM型RF阳性率为60％-78％。

机体因咽炎、扁桃体炎、猩红热、丹毒、脓皮病、风湿热等感染A组链球菌后，可产生链球菌溶血素O抗体，即“Anti-Streptolysin O(ASO)”。

人类C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)是指在机体受到感染或组织损伤时血浆中一些急剧上升的蛋白质(急性蛋白)。CRP可以激活补体和加强吞噬细胞的吞噬而起调理作用，从而清除入侵机体的病原微生物和损伤，坏死，凋亡的组织细胞，在机体的天然免疫过程中发挥重要的保护作用。关于CRP的研究已经有70多年的历史，传统观点认为CRP是一种非特异的炎症标志物，但近十年的研究揭示了CRP直接参与了炎症与动脉粥样硬化等心血管疾病，并且是心血管疾病最强有力的预示因子与危险因子。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素O、C反应蛋白的检测试剂盒及其制备方法和用途，用于解决现有技术中的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种定量检测类风湿因子(RF)、抗链球菌溶血素O(ASO)、C反应蛋白(CRP)的检测试剂盒，包括互相独立的类风湿因子检测试纸卡、抗链球菌溶血素O和C反应蛋白检测试纸卡，所述类风湿因子检测试纸卡、抗链球菌溶血素O和C反应蛋白检测试纸卡均各自包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、荧光标记物结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述类风湿因子检测试纸卡的荧光标记物结合垫上包含人变性IgG，所述抗链球菌溶血素O检测试纸卡的荧光标记物结合垫上包含链球溶菌素O(SLO)，所述C反应蛋白检测试纸卡的荧光标记物结合垫上包含C反应蛋白单克隆抗体，所述各硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线，所述荧光标记物结合垫上的链球溶菌素O、人变性IgG、C反应蛋白单克隆抗体采用荧光微球标记。

优选的，所述荧光标记物结合垫上的链球溶菌素O、人变性IgG、C反应蛋白单克隆抗体采用180nm荧光微球标记，EX(nm)＝650/Em(nm)＝670，具有信号受背景干扰小，检测灵敏度高，结果重复性好的优点。

优选的，为了使得试剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果，本发明中所述的荧光标记物结合垫还经过预处理，预处理中所使用的预处理缓冲液包括下列组分：水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠和甘氨酸，且水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠、甘氨酸的总浓度为3.5－7.5g/L，缓冲液的pH值为7.2－7.6。

优选的，各组分在缓冲液中的浓度为：

所述预处理缓冲液的溶剂为水。

所述预处理的具体步骤为：将荧光标记物结合垫在预处理液中浸泡1.5-2.5h，取出放于36-38℃烘干。

所述预处理缓冲液可使用本领域各种常用的pH调节剂进行pH值的调节。

优选的，所述底板为PVC底板。

优选的，所述硝酸纤维素膜上，检测线位于离加样端较近一侧，质控线位于离加样端较远一侧。

优选的，所述类风湿因子检测试纸卡的检测线上包被有人变性IgG。。

优选的，所述抗链球菌溶血素O检测试纸卡的检测线上包被有链球菌溶血素O。

优选的，所述C反应蛋白检测试纸卡的检测线上包被有C反应蛋白单克隆抗体。

优选的，质控线上包被羊抗鼠抗体。

优选的，还包括卡壳，所述卡壳包括背卡和上盖，所述背卡设有三个平行的试纸卡卡槽，所述试纸卡分别嵌于所述试纸卡卡槽内，所述上盖设有三个测试窗和三个加样孔，所述三个测试窗的位置分别与三个试纸卡的检测线和质控线的位置相配合，所述三个加样孔的位置与三个试纸卡的样品垫的位置相配合。

更优选的，所述卡壳为塑料卡壳。

更优选的，所述三个加样孔之间还设有连接三个加样孔的横槽。

优选的，所述检测试剂盒用于同时定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素O、C反应蛋白的含量。