[发明专利]一种离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用的D二聚体乳胶增强免疫比浊检测试剂盒

权利要求书

1.一种离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用的D二聚体乳胶增强免疫比浊检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2两种组分，所述试剂R1主要由缓冲液1、稳定剂1、防腐剂1、促凝剂和保护剂1组成；所述试剂R2主要由缓冲液2、交联D二聚体单克隆抗体的聚苯乙烯胶乳微球、稳定剂2、保护剂2、防腐剂2组成，其中聚苯乙烯胶乳微球与D二聚体抗体之间以共价交联或物理吸附方式连接，所述试剂R2中的稳定剂2采用离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用；其中离子稳定剂为NaCl、KCl、Na₂CO3、Na₂SO4或者K₂SO4，悬浮稳定剂为PEG8000、蔗糖、甘油或者葡萄糖。

2.如权利要求1所述的一种离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用的D二聚体乳胶增强免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中的缓冲液1选自Hepes缓冲液、Tris-HCl缓冲液、MOPS缓冲液、PBS缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼砂缓冲液、柠檬酸缓冲液中的一种或几种，其pH为6.0～9.0，浓度为25～500mmol/L。

3.如权利要求1所述的一种离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用的D二聚体乳胶增强免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中的缓冲液2选自PBS缓冲液、硼砂缓冲液、甘氨酸缓冲液、Hepes缓冲液、GOODS缓冲液、MOPS缓冲液中的一种或几种，其pH为7.0～9.0，浓度为25～500mmol/L。

4.如权利要求1所述的一种离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用的D二聚体乳胶增强免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中的稳定剂1选自KCl、NaCl、CaCl中的一种或者几种，其质量浓度为0.5％～10％。

5.如权利要求1所述的一种离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用的D二聚体乳胶增强免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中的防腐剂1为叠氮钠、硫柳汞或者ProClin300；所述试剂R2中的防腐剂2为叠氮钠、硫柳汞或ProClin300。

6.如权利要求1所述的一种离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用的D二聚体乳胶增强免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中的促凝剂为PEG8000或者葡聚糖。

7.如权利要求1所述的一种离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用的D二聚体乳胶增强免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中的聚苯乙烯乳胶微球的表面官能团为氨基、羧基、酰肼、醛基或环氧基，聚苯乙烯乳胶微球的粒径在100～500nm。

8.如权利要求1所述的一种离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用的D二聚体乳胶增强免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中的D二聚体抗体为兔抗人D二聚体单克隆抗体、鼠抗人D二聚体单克隆抗体一种或者几种。

9.如权利要求1所述的一种离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用的D二聚体乳胶增强免疫比浊检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中的保护剂1为EDTA，所述EDTA的浓度为10～100mmol/L，所述试剂R2中的保护剂2为牛血清白蛋白。

10.如权利要求1-9任一权利要求所述的利用表面官能团的D二聚体乳胶增强免疫比浊检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：

(1)试剂R1的制备：在缓冲液1中加入稳定剂1、促凝剂、防腐剂1、保护剂1，搅拌混合均匀，即得试剂R1；

(2)试剂R2的制备：用标记缓冲液将聚苯乙烯胶乳微球稀释到质量浓度为1％，再加入质量浓度为0.01％-0.1％的EDC，在室温下搅拌反应60min，反应结束后15000rpm离心洗涤以除去未反应的EDC，然后加入D二聚体单克隆抗体，37℃下搅拌反应4h，再加入终止液4h终止反应，将得到的反应液15000rpm离心、洗涤，最后用包括、稳定剂2、保护剂2、防腐剂2的缓冲液2将胶乳重悬。