[发明专利]一种具有清除展青霉素作用的植物乳杆菌

说明书

技术领域

本发明涉及一种具有清除展青霉素作用的植物乳杆菌，属于微生物技术领域。

背景技术

展青霉素又称棒曲霉素，是青霉属、曲霉属、丝衣霉属等霉菌代谢产生的一种有毒的真菌代谢产物。它对人及动物具有广泛而强烈的毒性作用。急性毒性表现为抽搐、痉挛、皮下组织水肿、肺肠充血、肠炎、无尿直至死亡；慢性毒性可导致胃溃疡，并具有抑制免疫、致畸性以及潜在的致癌性等。展青霉素能溶于水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和氯仿，微溶于乙醚、苯，不溶于石油醚，在酸性条件下化学性质稳定。

展青霉素是一种世界范围内的污染物，食品和饲料生产中展青霉素的污染相当普遍，广泛存在于苹果、葡萄、橘子、菠萝、玉米、奶酪和动物饲料等产品中，特别是在水果及以水果为加工原料的产品中的展青霉素污染最为严重。水果中展青霉素主要是由扩展青霉(Penicillium expansum)产生的，这种病菌不仅会引起果实腐烂，还会向果实组织中分泌大量的展青霉素。在果汁加工产业中，如果腐烂的果实混入原材料中，那么产出的果汁就会有不同程度的展青霉素的残留，给消费者(特别是儿童)的身体健康带来严重的危害。基于展青霉素对人体健康的潜在危害，世界上很多国家都对果汁产品中展青霉素的最大限量做了规定，EU、USFDA规定果汁产品中的展青霉素的最大限量为50μg/kg，婴幼儿产品中最大限量为10μg/kg，WHO建议每人每天展青霉素摄入量不超过0.4μg/kg体重。

目前主要通过吸附、微波处理等物理手段或添加添加剂、臭氧处理等化学手段进行去除展青霉素，但物理方法效果不是十分理想，而且很容易使展青霉素聚集到吸附材料中，对环境构成了潜在威胁。而化学方法存在成本高、安全性及去除机理尚不明确等问题，还未见在生产实际中得到应用。

鉴于传统的方法存在多种问题，亟需研发新型的展青霉素去除手段。目前通过微生物清除展青霉素的效率普遍不高，且局限于清除水溶液或培养液中的展青霉素，很少应用到食品和饲料中。本发明旨在筛选出能高效清除展青霉素的微生物并将其用于清除食品和饲料中的展青霉素。

发明内容

本发明要解决的第一个技术问题是提供一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，该菌株已于2014年08月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.9511。

所述植物乳杆菌CGMCC No.9511具有以下特性：

(1)菌落特征：在MRS培养基上生长良好，形成乳白色、半透明、圆形菌落，菌落表面湿润。细菌形态呈中长杆状，两端椭圆，革兰氏染色反应呈阳性，无运动性，不产芽抱。

(2)生长特性：该菌株的最低生长温度为15℃，最高生长温度为40℃，该菌株以30-37℃的生长温度为佳，最高和最低初始生长pH为9.0和3.0，最适生长初始pH为6.0；本发明植物乳杆菌CGMCC No.9511菌株的延迟期相对较短，4h左右开始进入对数生长期12h就达到稳定期。生长曲线如图1。

(3)具有耐酸性，在pH3.0-9.0环境条件下生长良好，在pH 2.5环境下存活良好。

(4)具有良好的胆盐耐受性，在胆盐浓度为0.1％—0.4％的范围内菌株生长良好。

(5)在含1000μg/L展青霉素的水溶液中，能够将展青霉素浓度降到18.1μg/L。

(6)在含1000μg/L展青霉素的培养基中，能够对展青霉素的清除率达90％以上。

(7)在含966.95μg/L展青霉素的苹果汁中，能够将展青霉素浓度降到102.81μg/L，清除率达89.37％。

(8)能够减小展青霉素对小鼠肠道微生物的影响。

本发明还提供一种制备用于清除展青霉素的植物乳杆菌CGMCC No.9511生物制剂的方法，将植物乳杆菌CGMCC No.9511活化培养后离心获得菌体，离心后的菌体经洗涤、离心得到植物乳杆菌CGMCC No.9511生物制剂。

或者，将菌体再用保护剂重悬达到浓度10¹⁰CFU/mL，然后将悬浮液培养一段时间后冷冻干燥得到植物乳杆菌CGMCC No.9511菌粉生物制剂。所述的保护剂为脱脂奶粉、海藻糖或蔗糖等。