[发明专利]一种铜钱草中残留抗生素诺氟沙星含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种铜钱草中残留抗生素诺氟沙星含量测定方法，属于生物医药检测技术领域。

背景技术

临床上过期的抗生素并无有效的回收途径，多采用随意丢弃的处理方式，从而导致其进入土壤及植物体内，严重污染环境。诺氟沙星（Ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ，ＮＦＣＸ）化学名为１-乙基-６-氟-１，４%二氢-４-氧代-７-（１一哌嗪基）-３-喹啉羧酸，是一种氟喹诺酮类抗菌药，因其具有抗菌谱广、抗菌作用强的特点，在临床上应用广泛，目前，诺氟沙星含量测定的研究对象多局限于复方制剂、动物源性食品以及血浆等，而关于植物中诺氟沙星残留量测定的研究国内外文献报道较少。

发明内容

本发明的目的是：提供一种铜钱草中残留抗生素诺氟沙星含量测定方法，该方法法操作简便，测定结果准确，可作为环境中残留抗生素诺氟沙星含量的检测方法，以克服现有技术的不足。

本发明的技术方案

一种铜钱草中残留抗生素诺氟沙星含量测定方法，该方法建立ＨＰＬＣ测定铜钱草中残留抗生素诺氟沙星含量。

前述的一种铜钱草中残留抗生素诺氟沙星含量测定方法中，所述的ＨＰＬＣ的建立为采用ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８色谱柱，流动相为甲醇－１％醋酸，体积比为１６∶８４，流速１.０ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长２８２ｎｍ，柱温３０℃。

由于采用上述技术方案，与现有技术相比，本发明通过线性范围、检出限、精密度、稳定性、重现性、回收率的系统性试验考察，证明ＨＰＬＣ法快速、检出限低、结果准确可靠，通过对生长于远离市区及化工污染区的铜钱草和贵阳市某医院花坛内铜钱草中留抗生素－诺氟沙星含量的测定，提示生长于医院内铜钱草中该抗生素污染程度高于生长于远离市区及化工污染区植物，推测残留在环境中的诺氟沙星能够在植物中富集，本方法可作为环境中诺氟沙星残留量的测定方法，为分析抗生素对于环境的影响提供依据。

附图说明

附图1为诺氟沙星紫外色谱图；

附图2为高效液相色谱图；

附图3为各样品加样回收率试验结果图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明作进一步的详细说明，但不作为对本发明的任何限制。

本发明的实施例：

１　仪器和试剂

天美ＬＣ２０００型液相色谱仪及相应的化学工作站（上海天美），ＡＬ-２０４电子天平（梅特勒－托利多），ＣＨ-２５０超声波清洗仪（北京创新德超声电子研究所），Ｃａｒｙ１００紫外分光光度计，诺氟沙星对照品（中国药品生物制品检定所，批号１３０４５０２００７０４）；贵阳市某医院花坛中铜钱草和生长于远离市区及化工污染区的铜钱草（阴性样品），甲醇为色谱纯，超纯水（自制），其它试剂均为分析纯。

２　方法与结果

２.１　色谱条件

色谱柱为ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８（４.６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），流动相为甲醇－１％醋酸（１６∶８４），流速为１.０ｍｌ／ｍｉｎ，柱温为３０℃，检测波长为２８２ｎｍ,对照品、样品进样量均为２０μｌ。

２.２　检测波长

取诺氟沙星对照品溶液适量加甲醇稀释，在２００～８００ｎｍ波长范围内进行紫外扫描，结果诺氟沙星在２８２ｎｍ处有最大收，故选择２８２ｎｍ作为诺氟沙星ＨＰＬＣ含量测定波长,扫描图谱见附图１。

２.３　样品的制备

２.３.１　对照品溶液的制备　

称取诺氟沙星对照品适量，加适量１％的醋酸溶液溶解，用流动相定容并稀释成含诺氟沙星５.２４８ｍｇ／Ｌ的对照品溶液。

２.３.２　供试品溶液的制备　

精密称取贵阳市某医院花园中生长的铜钱草５.０ｇ，用１％醋酸２５ｍｌ超声提取１５ｍｉｎ。过滤，低温将滤液挥干，再用流动相溶解定容至５ｍｌ容量瓶中。

２.３.３　阴性样品溶液的制备　

取生长于远离市区及化工污染区的铜钱草，按“２.３.２”项下方法制备阴性样品溶液。

２.４　系统性试验

精密吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性样品溶液分别注入高效液相色谱仪，按“２.１”项下色谱条件进样，记录色谱图，理论塔板数按诺氟沙星峰计算均不低于４０００，诺氟沙星峰与相邻成分达到基线分离，且阴性对照无干扰。对照品、样品与阴性样品的色谱图见附图２。

２.５　线性关系试验