[发明专利]一种疏脉半蒴苣苔的离体保存方法有效
申请号: | 201410739915.4 | 申请日: | 2014-12-09 |
公开(公告)号: | CN104756864A | 公开(公告)日: | 2015-07-08 |
发明(设计)人: | 李翠;韦莹;郭晓云;张占江;缪剑华;赵以民;韦坤华;李林轩;吕惠珍;王一诺;王晓峰 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区药用植物园 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 530023 广西*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 疏脉半蒴苣苔 保存 方法 | ||
1.一种疏脉半蒴苣苔的离体保存方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)外植体诱导培养:取野外采集的疏脉半蒴苣苔的顶芽作为外植体,在70%乙醇中浸泡30~45s,无菌水冲洗2~3次,投入添加2%吐温-20的0.1%升汞中8min,再用无菌水冲洗2~3次,切割为0.5~1.0cm长接种在接种培养基上,培养8~15d,顶芽分化形成嫩黄绿色丛生芽;所述培养基的pH值为5.8,培养温度为23~26℃,光照强度1400~2000lx,光照时间为10~12h/d;
(2)丛生芽壮苗生根培养:经20~35d,丛生芽长至2~3cm,转入生根培养基培养1个月后,长成具根和4~6片叶的试管苗;所述培养基的温度为23~26℃,光照强度2000~2800lx,光照时间为10~12h/d;
(3)试管苗离体保存:将由丛生芽分化产生的具有4~6片叶的试管苗,接种到保存培养基进行离体保存,培养温度为20±1℃,光照强度1400~2000lx,光照时间为8~10小时/天。
2.如权利要求1所述的疏脉半蒴苣苔的离体保存方法,其特征在于,步骤(1)中所述的诱导培养基为:MS+6-BA 0.5~1.5mg/l+IAA 0.5mg/l+KT 0.3mg/l+蔗糖2.5%~3%+琼脂0.4%~0.45%。
3.如权利要求1所述的疏脉半蒴苣苔的离体保存方法,其特征在于,步骤(2)中所述的壮苗生根培养基为:1/2MS+IBA1.0~1.5mg/l+6-BA0.5mg/l+AC0.5%+蔗糖2.5%~3%+琼脂0.4%~0.45%。
4.如权利要求1所述的疏脉半蒴苣苔的离体保存方法,其特征在于,步骤(3)中所述的保存培养基为1/2MS+PPP333 1.0mg/l+AC 0.5%+蔗糖2.5%~3%+琼脂0.38%~0.48%。
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