[发明专利]一种淫羊藿总黄酮中乙酸乙酯、正丁醇溶剂残留量的测量方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种淫羊藿总黄酮中乙酸乙酯、正丁醇溶剂残留量的测量方法，属于生物医药检测技术领域。

背景技术

淫羊藿为小檗科植物淫羊藿Ｅｐｉｍｅｄｉｕｍｂｒｅｖｉ-ｃｏｒｎｕＭａｘｉｍ、箭叶淫羊藿Ｅｐｉｍｅｄｉｕｍ.ｓａｇｉｔｔａｔｕｍ（Ｓｅｂ.ｅｔＺｕｃｃ.）Ｍａｘｉｍ、柔毛淫羊藿Ｅｐｉｍｅｄｉｕｍ ｐｕ-ｂｅｓｃｅｎｓ Ｍａｘｉｍ或朝鲜淫羊藿Ｅｐｉｍｅｄｉｕｍ ｋｏｒｅａｎｕｍ Ｎａｋａｉ的干燥叶，其主要有效成分为总黄酮，淫羊藿苷，多糖等,淫羊藿总黄酮在提取纯化的工艺中使用了乙酸乙酯和正丁醇两种有机溶剂，为保证用药的安全性，有必要对乙酸乙酯、正丁醇有机溶剂残留量进行研究和控制。

发明内容

本发明的目的是：提供一种淫羊藿总黄酮中乙酸乙酯、正丁醇溶剂残留量的测量方法，该方法简单可行，检测精度高，符合相关国家标准，以克服现有技术的不足。

本发明的技术方案

一种淫羊藿总黄酮中乙酸乙酯、正丁醇溶剂残留量的测量方法，该方法建立气相色谱法来测定淫羊藿总黄酮中有机溶剂乙酸乙酯和正丁醇残留量,该方法中以甲醇为溶剂，异戊醇为内标。

前述的一种淫羊藿总黄酮中乙酸乙酯、正丁醇溶剂残留量的测量方法中，具体方法为采用毛细管气相色谱法，以ＳＥ５４毛细管柱为色谱柱，程序升温，氮气为载气，进样口温度为２３０℃，ＦＩＤ检测器温度为２４０℃。

由于采用上述技术方案，与现有技术相比，本发明采用毛细管气相色谱法，以甲醇为溶剂，异戊醇为内标，对淫羊藿总黄酮中的乙酸乙酯和正丁醇残留量进行测定，结果表明，该方法操作简便、灵敏度高，准确度好，可作为淫羊藿总黄酮提取物中有机溶剂残留量的测定方法。

附图说明

附图1为淫羊藿总黄酮在对照组溶液的气相色谱图；

附图2为淫羊藿总黄酮在正丁醇溶液的气相色谱图；

附图3为淫羊藿总黄酮在阴性对照溶液的气相色谱图；

附图4为样品中溶剂残留量测定结果示意图；

附图5为正丁醇回收率实验结果示意图；

附图6为样品中溶剂残留量测定结果示意图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明作进一步的详细说明，但不作为对本发明的任何限制。

本发明的实施例：

１　仪器与试剂

１.１　仪器

ＧＣ-１４Ｂ气相色谱仪（日本岛津），氢火焰离子检测器、ＷＭＬ色谱工作站（南宁威玛龙色谱科技公司），超声波清洗机（２５０Ｗ，２９～３４ｋＨｚ，北京医疗设备二厂）及微量进样器（上海安亭微量进样器厂）。

１.２　试剂

正丁醇、乙酸乙酯、异戊醇均为色谱纯，甲醇为分析纯；淫羊藿总黄酮（批号２０１００９１２，２０１００９１６，２０１００９２１）由贵阳医学院药学院分析化学教研室提供。

２　方法与结果

２.１　色谱条件

ＳＥ-５４毛细管柱（３０ｍ×０５３ｍｍ，１μｍ）；进样口温度２３０℃，ＦＩＤ检测器温度２４０℃,高纯氮气作为载气，柱前压为２５ｋＰａ，分流比１０∶１；氢气５０ｍｌ／ｍｉｎ，空气流速４５０ｍｌ／ｍｉｎ；采用程序升温，起始温度３５℃（室温３５℃以下进行）维持３ｍｉｎ，以２℃／ｍｉｎ速率升温至５０℃，维持２ｍｉｎ,进样量１.０μｌ,理论塔板数按乙酸乙酯计不低于３０００，按正丁醇计不低于６０００。

２.２　溶液的配制

２.２.１　标准溶液配制

吸取乙酸乙酯、正丁醇适量，加甲醇制成每１ｍｌ中含乙酸乙酯０.０８０３ｍｇ，正丁醇０.０８１１ｍｇ的储备液,分别吸取储备液０.２、０.６、１.０、１.２、２.０ｍｌ，置于１０ｍｌ量瓶中，再吸取内标溶液０.１ｍｌ至各量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得系列标准溶液。

２.２.２　内标溶液的配制

称取异戊醇０.０１８２ｇ，置５０ｍｌ量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得。

２.２.３　供试品溶液的配制

精密称取三批淫羊藿总黄酮约３０ｍｇ，置１０ｍｌ量瓶中，精密吸取内标溶液０.１ｍｌ，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

２.２.４　阴性对照溶液的制备

称取未经乙酸乙酯、正丁醇纯化的淫羊藿总黄酮３０ｍｇ，置１０ｍｌ量瓶中，加甲醇溶解至刻度，摇匀使溶解，即得。

２.３　专属性试验