[发明专利]一种上焦水饮内停大鼠模型及其构建方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种上焦水饮内停大鼠模型及其构建方法，属于医疗评价、检测技术领域。

背景技术

中医认为肺居于上焦，故称“华盖”又称之为“水之上源”。肺的主要生理功能是主气、司呼吸、主宣发肃降，通调水道。津液的运行敷布与肺的宣降运动有关。“脾气散精，上归于肺，”肺通过宣发作用将津液敷布到头面诸窍，皮毛腠理。而藉着其肃降作用将津液输送至其他脏腑，下注膀胱，如此则水精四布，五经并行，脏腑及全身皆得营养。肺为水之上源，肺气宣降失职，水精不得四布，则留饮与肺中为痰为饮。痰饮蕴肺又能引起肺气郁而不宣或逆而不降，即所谓“痰因气成，气因痰成”。

上焦水饮内停是临床常见证型，许多慢性疾病均伴有上焦水饮内停证。其主要是由于气道梗阻，外感风寒，淤血阻肺等原因导致肺失宣降，通调失职，聚水为痰饮。《医贯·内经十二官·形景图记》：“喉下为肺，两叶白莹，谓之华盖，以覆诸脏，虚如蜂巢，下元透窍，故吸之则满，呼之则虚，一呼一吸，本之有源，无有穷也，乃清浊之交运，人身之橐龠”。肺为呼吸之橐龠，是清气吸入，浊气排出的产所，这一清浊交运是肺宣发肃降的具体表现。气道梗阻，则有碍于肺宣发肃降的协调共济，导致水湿停聚。《景岳全书》云：“风寒之痰以邪自皮毛，侵袭与肺，肺气不清乃至生痰”。可见风寒外袭，内舍于肺，影响肺之气化，肺津不布，可凝为痰饮。关幼波老师亦提出“痰与血同属阴，易于胶结凝固，气血流畅则津液并行，无痰以生，气滞血瘀痰结”是言血行淤阻而生痰。《金匮》心水者，其身少气，不得卧，烦而躁，其人阴肿。这些描述与心衰临床症状相似。可见心主行血，血行不利，淤血一旦形成，也可影响肺失宣降，使水湿停聚生痰饮。

为进一步深入探讨上焦水饮内停本质及探寻其有效治疗中药，很有必要进行上焦水饮内停大鼠模型复制的研究。模型复制时需考虑动物的生物学特性，尽量选择与人生理、代谢、疾病特点相似，符合试验目的的动物。由于动物症状、体征采集的复杂性，故理性的动物模型不仅要求在症状体征上与人相近或相同，更需要用量化的客观指标来准确评价。

目前，还未见有上焦水饮内停大鼠模型。仅见痰浊蕴肺，寒饮蕴肺，等大鼠模型的报道，多采用熏烟、气管滴注脂多糖、外加寒冷刺激的方法造模。但病因、表现等符合中医理论的指导的造模并不多见，中医证候的研究亟需符合中医症状特点的动物模型。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种上焦水饮内停大鼠模型及其构建方法，以肺失宣降水饮内停病机理论为指导，采用大鼠气管插管，结合腹部皮下注射异丙肾上腺素，外加寒冷刺激模拟肺失宣降，并设计专门时序，用大鼠诱导40天，建立一种上焦水饮内停大鼠模型。并主要从水湿这一方面进行评价，结果表明该方法可成功复制上焦水饮内停动物模型，而且该复制方法稳定性、重复性好，简单、客观，符合中医理论的指导。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

一种上焦水饮内停大鼠模型的构建方法，包括以下步骤：

(1)将无特定病原体(SPF)级维斯塔尔(Wistar)大鼠置于独立送回风净化笼(IVC)中，饲以普通饲料，自由进食、饮水；

(2)对Wistar大鼠给予异丙肾上腺素腹部皮下注射，第一天20mg/kg、第二天10mg/kg、第三天5mg/kg、从第四天开始3mg/kg.d，连续20天，观察两周；

(3)行气管内置管：第34天，使用气管插管装置(包括气管插管外套管、内管，内置管套于內管顶端)进行气管内置管的置入。大鼠仰卧固定，气道在食道上方，开口器上挑，可见气道口，声门呈鱼嘴状开合，将插管弧度朝上，把握好大鼠呼吸节奏，趁声门打开瞬间迅速将准备好的插管装置插入大鼠气管至标记部位，声门下1cm，先将內管抽出，顶端的气管内置管受外套管阻挡后断开与装置连接，抽出外套管，内置管便被置入动物气管中，保留7天；

(4)将行气管内置管后的Wistar大鼠每日置于温度为0℃的冰柜中4小时，接受寒冷刺激，连续7天。得到上焦水饮内停大鼠模型。

造模过程中，观察大鼠一般状况。模型建立结束后，以心肺组织病理学作为评价组织损伤程度的客观指标，结合其他心肺损伤指标(肺通透指数、肺泡灌洗液回收量、肺湿干重比W/D、心肺脏器指数、肌酸激酶CK表达)来综合评价上焦水饮内停大鼠模型建立的成功与否。

本发明主要从水湿这一方面对上焦水饮内停大鼠模型进行评价，具体评价指标如下：

①一般状况观察：模型组大鼠出现皮毛干枯晦暗，呼吸急促，伴有喘鸣音，唇舌黏膜紫暗，鼻部有少量血性分泌物，活动量差等症状；