[发明专利]一种富血小板血浆分离胶及富血小板血浆制备方法

说明书

技术领域

本发明属于血液取样、分离领域，具体涉及一种富血小板血浆分离胶及利用该分离胶分离制备富血小板血浆的方法。

背景技术

富血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP)，是自体全血经离心后得到的血小板浓缩血浆。血小板中含有大量的生长因子，如血小板衍生生长因子(PDGF)，转化生长因子-β(TGF-β)，类胰岛素生长因子(IGF)，表皮生长因子(EGF)，血管内皮生长因子(VEGF)等，这些生长因子主要由血小板活化后分泌，可以从不同方面对组织中细胞和基质的再生起到促进作用，从而促进组织的修复。

现有的PRP制备的方法中，按离心次数，可分为一次、二次及三次离心法，大量研究证明，二次离心法提取的PRP质量最高，其在临床上的应用也最广。制备步骤大致如下：

(1)将若干外周血抽入含抗凝剂的无菌试管中。

(2)进行第1次离心，离心后血液如图1所示分为三层：上层为贫血小板血浆，主要成分是纤维蛋白原等；中层为高度浓缩的血小板，下层为红细胞。

(3)用吸管吸取上层、中层以及邻近中层的部分红细胞，将其移入另一无菌试管中。

(4)2次离心后血浆分为三层：下层为少许红细胞，上层为贫血小板血浆，两层之间便为富血小板血浆层。

(5)用吸管遗弃大部分的上清液，留取适量的血浆以悬浮浓缩的血小板并混匀，即为富血小板血浆(PRP)。

(6)加入微量凝血酶及氯化钙，激活其中的血小板即获得富血小板血浆凝胶(APG)。

目前PRP的制备方法简单，且设备要求较低。然而，二次离心法之所以未被临床广泛使用主要在于其具有以下缺点：

(1)离心分层后无法形成有效的隔离，由于血小板的比重接近血细胞，故大部分的血小板将停在血浆与血细胞的交界处，吸取过程中容易吸入血细胞，且容易重新混匀导致无法收集PRP；

(2)开放式的制备体系容易受到外界污染；

(3)多个容器间的转移，增加了血小板被污染和激活的机率；

(4)操作人员的个人习惯及拿捏尺度极大地影响了PRP中血小板的浓度，使制备的PRP血小板回收率较低。

故制备得到的富血小板血浆富集系数低，血小板回收不全，回收率偏低，操作繁琐，容易出现人为的误差甚至失误导致获得较少量的PRP甚至是失效的PRP。

发明内容

本发明的目的是为了克服上述技术问题，提供一种血液分离胶及利用该分离胶分离制备富血小板血浆的方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案为：一种富血小板血浆分离胶，是通过向基础高分子化合物中加入比重调节剂和触变剂制成，所述基础高分子化合物是由以下重量比的原料制成的：

进一步地，加入所述比重调节剂与基础高分子化合物的重量比和有机触变剂与基础高分子化合物的重量比分别为4-5：100和9-12:1000。

进一步地，所述比重调节剂为粒径为7-20nm的二氧化硅。

进一步地，所述有机触变剂含有N-OH结构。

进一步地，所述有机触变剂为BYK-420触变剂。

本发明的内容还包括所述的富血小板血浆分离胶的制备方法，包括以下步骤：

1)将以下重量份的原料混合：乙酸丁酯120，苯乙烯75-80，丙烯酸丁酯20-25，丙烯酸5-12，偶氮二异丁腈2-2.5，十二烷基硫醇0.5-0.8，置密封的反应釜内，混匀，加热到80-120℃，反应6-8小时，合成基础化合物；

2)使系统真空度低于-0.098Mpa，温度升至190-200℃，保持6-8小时；

3)250目精细过滤并称重；

4)按基础化合物质量4-5％加入二氧化硅，连续搅拌分散1小时；

5)当温度≤25℃时，缓慢搅拌同时加入基础化合物质量0.9-1.2％的有机触变剂；

6)利用行星动力混合机，搅拌混合3-4h；

7)在真空状态下脱去气泡；

8)带负压静置12h后，解压，分装。

本发明的内容还包括一种用于制备富血小板血浆的真空采血管，含有所述富血小板血浆分离胶。

本发明的内容还包括所述的富血小板血浆的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)按照上述的方法制备富血小板血浆分离胶；

2)利用所述分离胶，制备真空采血管；

3)利用所述真空采血管准确采集血液；

4)离心后吸去上层贫血小板血浆；