[发明专利]一种大豆磷脂脂质体的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医用药物载体制备领域。

背景技术

脂质体是由磷脂分子在水中形成的具有双分子膜的球形囊泡，它具有与细胞膜相类似的结构，因此有很好的生物相适性。通过在脂质体膜中掺入一些靶向物质，可以使脂质体向特定部位靶向集中，因此近年来脂质体被广泛地用于药物载体的研究脂质体的主要材料有合成磷脂和天然磷脂。合成磷脂价格昂贵，一般只能用于研究中。天然磷脂有大豆磷脂和蛋黄磷脂，其中大豆磷脂中脂肪酸含量高并且脂肪链具有高度的不饱和性，以大豆卵磷脂为膜材制备的脂质体具有很好的流动性和渗透性，不仅有利穿透表面屏障，而且有利于引发细胞之间的生化反应。

发明内容

本发明的目的是提供一种采用大豆磷脂制备脂质体的方法。

本发明通过以下技术方案予以实现：一种大豆磷脂脂质体的制备方法，将n(大豆磷脂)：n(胆固醇)：n(维生素E)=1：1：0.05，加入到50mL圆底烧瓶中，加入3mL氯仿，缓慢搅拌使之溶解，将圆底烧瓶连在旋转蒸发仪上，通氮气保护并维持瓶内真空度为700mmHg蒸发去除氯仿，使磷脂和胆固醇在瓶壁形成一层薄膜。再加入3mL乙醚使薄膜溶解，再加入1mL含有钙黄绿素的磷酸盐缓冲溶液(PBS)。将此混合溶液在水浴超声波仪器上进行超声混合4～5min，同时将冰块加入到超声仪的水中,将此圆底烧瓶再次连在旋转蒸发仪上，减压蒸发，同时通入氮气，瓶内保持真空度小于400mmHg，旋转速度为200rg·min^-1，去除有机溶剂至凝胶形成，继续减压(瓶内保持压力为300mmHg～350mmHg)15min，形成水性悬浊液，瓶内的真空度逐渐增加至700 mmHg，并保持30min，进一步去除残留的有机溶剂，最后充氮气至乙醚味消失,得到大豆磷脂脂质体。

所述大豆磷脂为含有93.62%的磷脂酰胆碱的大豆磷脂。

本发明具有如下有益效果：

制备的脂质体为圆球状的小囊泡，大小均匀，具有广泛的应用前景。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。

具体实施例：本发明所述制备过程包括将n(大豆磷脂)：n(胆固醇)：n(维生素E)=1：1：0.05，加入到50mL圆底烧瓶中，加入3mL氯仿，缓慢搅拌使之溶解，将圆底烧瓶连在旋转蒸发仪上，通氮气保护并维持瓶内真空度为700mmHg蒸发去除氯仿，使磷脂和胆固醇在瓶壁形成一层薄膜。再加入3mL乙醚使薄膜溶解，再加入1mL含有钙黄绿素的磷酸盐缓冲溶液(PBS)。将此混合溶液在水浴超声波仪器上进行超声混合4～5min，为了防止水温的升高，同时将冰块加入到超声仪的水中,将此圆底烧瓶再次连在旋转蒸发仪上，减压蒸发，同时通入氮气，瓶内保持真空度小于400mmHg，旋转速度为200rg·min^-1，去除有机溶剂至凝胶形成，继续减压(瓶内保持压力为300mmHg～350mmHg)15min，形成水性悬浊液，瓶内的真空度逐渐增加至700 mmHg，并保持30min，进一步去除残留的有机溶剂，最后充氮气至乙醚味消失,得到大豆磷脂脂质体。所述大豆磷脂为含有93.62%的磷脂酰胆碱的大豆磷脂。

对制得的大豆磷脂脂质体进行透射电镜分析，其微粒为圆球状囊泡，大小均匀，其包封率在45%以上，在10h时，钙黄绿素泄漏了60.32％，泄漏率低，具有一定的缓释作用。

   以上内容是结合具体的实施方式对本发明所做的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。