[发明专利]黄蜀葵花生物总碱提取物及其制备方法与应用

说明书

(一)技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及黄蜀葵花生物总碱提取物及其制备方法，以及在制备镇痛药物中的应用。

(二)背景技术

中成药在我国医药产业中有及其重要的地位。多数中药产品有制剂药效成分不清楚、疗效不确切、制取工艺原始、质量难控制等问题。采用现代方法研究，明确药效部位或有效成分，通过二次开发，达到去粗取精，质量可控，安全有效，是中药现代化的必由之路。

疼痛是临床疾病最常见的重要症状，给病人带来身体痛苦和精神重负，需要镇痛药治疗。目前的化学镇痛药物主要由两大类组成，即以阿司匹林为代表的解热镇痛药和吗啡为代表的成瘾性镇痛药，均有严重不足：解热镇痛药对严重疼痛药效差，而且有胃出血，溃疡严重胃肠道毒副反应；成瘾性镇痛药疗效好但有成瘾、呼吸抑制等严重不良反应，因此需要寻找、开发高效低毒新药以满足日益增长的临床需求。

黄蜀葵(Abelmoschl manihot L medic)花为锦葵科植物黄蜀葵的干燥花。性味甘寒滑，无毒，具有清利湿热，消炎解毒之功效，内服主治五淋，水肿；外用治疗痈疽肿毒，烫伤，其花蕾在一些地方作为蔬菜食用，安全无毒。从黄蜀葵花中提取的总黄酮(范丽,董六一.黄蜀葵花总黄酮镇痛作用研究[J].中药药理与临床,2003,19(1):12-14.)有良好的镇痛作用。其中黄酮类化合物金丝桃甙对口腔溃疡有良好镇痛作用(司徒曼丽,马传庚,宋必卫,等.黄蜀葵结晶Ⅲ对口腔溃疡镇痛作用的研究[J].华西口腔医学杂志,1985,3(3):129-31.)，被认为是其有效单体成分(宋必卫,马传庚,徐叔云.金丝桃甙对抗缓激肽,钾离子和组织胺致痛作用的实验研究[J].中国药理学通报,1986,2(2):14-14.)。然而分离提取的金丝桃甙得率很低，成本昂贵；国内多个研究单位试图合成金丝桃甙，均因技术困难失败，故未能开发成药。

(三)发明内容

本发明在研究黄蜀葵花乙醇提取物、金丝桃甙粗提物(含金丝桃甙50-60％)、高纯化的金丝桃甙(含金丝桃甙99％)的镇痛作用时发现，金丝桃甙粗提物镇痛作用明显比高纯化的金丝桃甙效果好，且易于溶解，因此认为黄蜀葵花镇痛作用有效成分/部位不仅仅是金丝桃甙，而是有多种。

通过进一步的研究，发现黄蜀葵花镇痛作用新的有效部位生物总碱。黄蜀葵花生物总碱比其它部位镇痛作用更强，可以用于开发、生产高效低毒的新型镇痛药。

本发明的目的在于提供黄蜀葵花生物总碱提取物，及其制备方法，以及在制备镇痛药物中的应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种黄蜀葵花生物总碱提取物，所述黄蜀葵花生物总碱提取物是按如下方法制备得到的：

(a)超临界CO₂萃取：将黄蜀葵花粉末和55～99.7％乙醇(夹带剂)混合，在40～70℃，10～30Mpa的条件下，进行超临界CO₂萃取1～2.5h，所述CO₂的流量为2～6kg/h，萃取所得粗提液旋蒸除去乙醇，得到黄蜀葵花浸膏；

(b)有机溶剂萃取：将步骤(a)中所得黄蜀葵花浸膏先用水分散，再加入石油醚萃取，分液得到石油醚层和水层，弃去石油醚层，取水层用乙醚萃取，分液得到乙醚萃取液；

(c)生物总碱分离：在步骤(b)所得乙醚萃取液中，加入0.5％～2％HCl溶液萃取，分液得到酸层和乙醚层，弃去乙醚层，所得酸层用5％～25％NaOH溶液滴定至中性，再经旋蒸除水，即得黄蜀葵花生物总碱。

本发明黄蜀葵花生物总碱提取物，推荐步骤(a)中所述乙醇的体积用量以黄蜀葵花粉末的质量计为0.5～3.0mL/g。

推荐步骤(b)中所述用于分散的水的体积用量以黄蜀葵花浸膏的质量计为10～20mL/g；所述石油醚的体积用量以黄蜀葵花浸膏的质量计为60～100mL/g；所述水层与用来萃取的乙醚的体积比为1：4～8。

推荐步骤(c)中所述乙醚萃取液与所述HCl溶液的体积比为1：1～2。

本发明还提供了一种药物组合物，所述药物组合物中含有本发明所述的黄蜀葵花生物总碱提取物和药用可接受的载体。

所述药物组合物可以为口服剂、外用剂、注射剂或复方制剂。

本发明所述的黄蜀葵花生物总碱提取物可作为有效成分，用于制备治疗临床疼痛(如头痛、牙痛、关节痛，外伤疼痛等)的镇痛药物。

本发明的创新点为：(1)首次提出并证明黄蜀葵花生物总碱提取物的镇痛作用；(2)所述黄蜀葵花生物总碱提取物的制备方法简单，成本低。