[发明专利]一种CA16病毒感染沙鼠的动物模型及应用

说明书

本发明公开了一种CA16病毒感染沙鼠的动物模型及评价疫苗的应用，所述的方法为：将CA16病毒腹腔注射感染沙鼠，每只沙鼠的注射量为1.0×10^3.0‑1.0×10^5.0 TCID₅₀，获得感染CA16病毒的沙鼠；本发明模型极大模拟了临床病人感染CA16病毒后在神经系统方面出现的病变，如脑干和脊髓等组织，而已有的新生鼠模型则没有；结合已有的EV71病毒感染沙鼠模型，可以做为评价EV71/CA16双联疫苗保护效果的动物模型。

(一)技术领域

本发明涉及一种动物模型的构建方法，特别涉及一种CA16病毒感染沙鼠的动物模型及其评价疫苗的应用。

(二)背景技术

柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)属于小核糖核酸病毒科，肠道病毒属成员，1952年在南非首次被分离出来，是引起手足口病(HFMD)的主要病原体之一。CA16感染可以导致5岁以下婴幼儿出现手、足、口部疱疹、咽峡炎等症状，少数患者可以出现心肌炎、无菌性脑膜炎等多种并发症。CA16常与另外一种肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)交替或共同流行，自20世纪90年代以来导致了中国大陆、中国台湾和其他亚太地区的多次手足口病爆发流行，2008年后在亚太地区以外的多个国家也出现了高强度的流行，以往认为HFMD中严重与死亡病例主要由于EV71病毒感染所致，忽略了对CA16的研究。而现在对CA16感染导致的重症和死亡病例在美国、法国、日本、中国台湾和中国大陆等地区均有报道，并且CA16还可与EV71发生遗传物质重组，加大了重症HFMD的防控难度。

我国研发的EV71疫苗已经进入三期临床阶段，其中多种EV71感染动物模型(乳鼠、食蟹猴和猕猴等)的建立与不断完善，极大促进了EV71病毒的机理研究及EV71疫苗的顺利研发。国际上对CA16疫苗的研发进展相对缓慢，目前已报道的CA16感染动物模型只有一种新生鼠模型，但新生鼠对CA16病毒的敏感期很短，只有日龄小于7天的新生鼠才对CA16病毒敏感，这不仅加大了实验的操作难度，同时由于许多实验如疫苗长期保护效果评价等持续时间往往不止一周，制约了新生鼠在理论研究和疫苗评价等产业化方面的应用，而非人灵长类动物模型如猕猴等由于成本较高，即使开发成功也不利于大规模的应用研究。因此开发一种经济、实用和有效的动物模型，不仅可以更加深入的研究CA16病毒，阐明CA16病毒的感染途径和致病机理，同时也将加快CA16疫苗及EV71/CA16双价疫苗的研发步伐，为解决我国HFMD这一严重的公共卫生问题打下基础。

长爪沙鼠(Meriones unguiculatus)又称长爪沙土鼠，属于仓鼠科、沙鼠属，大小介于大白鼠和小白鼠之间，易饲养和繁殖，其作为实验动物在医学领域的应用已有30多年历史，是研究脑梗塞，癫痫和丝虫病等疾病的理想动物模型。申请人前期利用沙鼠动物模型成功研发出了我国流行性出血热疫苗，证明这是一种稳定的、适用于疫苗免疫效果评价的动物模型。

(三)发明内容

针对现有CA16感染动物模型只有新生小鼠模型的不足，本发明提供了一种对CA16病毒敏感期长达21天，模拟CA16感染临床病人神经性并发症的沙鼠动物模型及其建立方法以及该动物模型在评价疫苗中的应用。

本发明采用的技术方案是：