[发明专利]茶叶中外源添加12种水溶性合成色素的快速简便检测方法

说明书

技术领域

本发明属于化学分析技术领域，具体涉及茶叶中外源添加12种水溶性合成色素的快速简便检测方法。

背景技术

按GB 2760-2011《食品添加剂使用标准》，茶叶是不许添加任何外来添加剂，包括任何色素，但是茶叶中的外源添加合成色素虽然是非常规性质量安全问题，在违法成本相对低廉的现实情况下，违法添加以达到改善外观等质量指标的茶叶安全事件但还是时有发生。如，2004年上海的一些茶叶店和大型茶叶批发市场发现了用色素染出来的浙江丽水碧螺春。2005 年质检总局就查出了不法分子用工业颜料炒出“铅铬绿茶”。2007 年天台质量技术监督局查处了200kg添加色素茶叶。2010年青岛沂南废茶叶掺上香精和色素做成饭店宾馆免费茶。2012年宝应成茶加色素变“现炒现卖正宗绿杨春新茶”。2012年重庆的红茶出口市场因在茶叶发酵过程中加入非茶叶原料和大量色素已陷入绝境。

合成色素的检测目前国内外合成色素检测方法主要有聚酰胺吸附法、液液分配法、羊毛染色法、基体固相分离法、固相萃取法、浊点萃取法等，相对应结合分光光度法、毛细管电泳法、极谱法、微柱法、高效液相色谱法和高效液相色谱-质谱联用法等检测方法。如，1999年丁晖利用HPLC测定果味型碳酸饮料中日落黄、柠檬黄；2006年Jochen K等采用HPLC法测定鱼子和鱼子酱中的色素；2007年Katerina S M 等采用HPLC-DAD检测食品中13种水溶性色素；2008年， Yoshioka N使用短柱测定了饮料和糖果中的40种人工合成色素；2009年，邢文静等用HPLC测定了橙汁中亮蓝等5种色素；2010年顾慧莹等用UPLC测定饮料中胭脂红等6种色素；2011年，Constantinos K等用HPLC测定调味品中对位红和苏丹红Ⅰ～Ⅳ等5中染料；2011年李瑾瑾等结合HPLC-VWD及HPLC-MS/MS分别测定了螺蛳和饮料中的14和12种色素；2011年陈岑等用HPLC-TOF-MS测定了硬糖、饮料中36种色素和调味料中19种色素；2012年龙巍然等用毛细管区带电泳法测定饮料中酸性红92、亮黑等色素；2013年Schummer C用UPLC-MS/MS法测定调料和含辣椒制品中苏丹红Ⅰ~Ⅳ；2013年Guo J用离子液体分散液液微萃取测定软饮、糖果、果胶等中的亮蓝；2014年Qi P用HPLC-FLD测定含辣椒制品中的罗丹明B；2014年Khodadoust S用紫外可见光光谱法测定水中甲基红。

应该说食品中合成色素的检测方法研究不少，但是一是食品基质方面，多涉及硬糖、饮料等基质相对简单的食品，对于较为复杂基质的食品也集中于肉类、奶酪等高脂肪、高蛋白质的种类，作为多年生木本植物及后续加工过程繁复的茶叶的相关研究则缺失，而且因其茶叶样品基质背景异常丰富，高天然色素类、高小分子基质干扰又使得茶叶中外源添加合成色素的检测方法不可能照搬饮料、糖果或者肉类、奶酪等的检测方法。另外，本发明涉及的柠檬黄、苋菜红等水溶性合成色素在ESI源下离子化不理想，因此近几年来主要依靠LC-MS等仪器技术进行几十种合成色素检测的已有研究中，也未涉及本发明内容。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供茶叶中外源添加12种水溶性合成色素的快速简便检测方法的技术方案。

所述的茶叶中外源添加12种水溶性合成色素的快速简便检测方法，其特征在于包括以下步骤：

1）标准溶液配制

单一色素标准溶液：准确称取水溶性合成色素标准品，用50%甲醇稀释，逐一配制成色素1000mg/L的单一农药标准液，备用；

色素混合标准溶液：根据各色素在仪器上的响应值，逐一吸取单一农药标准液分别注入同一容量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，配制成混合标准溶液，备用，使用前用50%甲醇稀释成所需浓度的标准工作液；

2）试料制备：取不少于100g茶叶样品，放入粉碎机中粉碎，制成待测样，放入分装容器中备用；

3）提取：准确称取1.00g茶叶放人15mL具塞管中，加入10mL碱性试剂，在振荡器中上快速振荡30s，后用超声辅助提取20min，取上清液1mL加入20uL乙酸，过0.45umPTFE滤膜后再进行测定；

4）色谱分析：由自动进样器吸取10μL标准混合溶液(或样品)注入色谱仪中，以保留时间定性，以样品溶液峰面积与标准溶液峰面积比较定量；