[发明专利]管角螺微卫星位点及其引物和应用

权利要求书

1.管角螺微卫星位点，其特征在于具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.14中任一的碱基序列，它们分别标记编号为HT1、HT2、HT3、HT4、HT5、HT6、HT7、HT8、HT9、HT10、HT11、HT12、HT13、HT14。

2.权利要求1所述管角螺微卫星位点的组合，其特征在于包括管角螺微卫星位点HT1、HT2、HT3、HT4、HT5、HT6、HT7、HT8、HT9、HT10、HT11、HT12、HT13、HT14。

3.权利要求1所述管角螺微卫星位点的引物，其特征在于：所述管角螺微卫星位点HT1、HT2、HT3、HT4、HT5、HT6、HT7、HT8、HT9、HT10、HT11、HT12、HT13、HT14的引物分别包括具有SEQ.ID.No.15/16、17/18、19/20、21/22、23/24、25/26、27/28、29/30、31/32、33/34、35/36、37/38、39/40、41/42中的一对碱基序列，它们分别标记编号为HT1p1/p2、HT2p1/p2、HT3p1/p2、HT4p1/p2、HT5p1/p2、HT6p1/p2、HT7p1/p2、HT8p1/p2、HT9p1/p2、HT10p1/p2、HT11p1/p2、HT12p1/p2、HT13p1/p2、HT14p1/p2。

4.权利要求3所述管角螺微卫星位点的引物组合，其特征在于包括引物HT1p1/p2、HT2p1/p2、HT3p1/p2、HT4p1/p2、HT5p1/p2、HT6p1/p2、HT7p1/p2、HT8p1/p2、HT9p1/p2、HT10p1/p2、HT11p1/p2、HT12p1/p2、HT13p1/p2、HT14p1/p2。

5.权利要求1或2所述管角螺微卫星位点或其组合在管角螺的种群遗传多样性检测、个体鉴定或分子辅助育种方面的应用。

6.权利要求3或4所述管角螺微卫星位点的引物或其组合在管角螺的种群遗传多样性检测、个体鉴定或分子辅助育种方面的应用。

7.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于管角螺的种群遗传多样性检测按以下步骤进行：

<1>基因组DNA的提取：采用CTAB抽提法提取管角螺基因组DNA；

<2>微卫星PCR扩增：采用三引物检测法检测筛选管角螺微卫星引物，并将筛选出的微卫星引物扩增基因组DNA，获得管角螺个体微卫星扩增产物；

<3>扩增产物电泳：8％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，硝酸银染色检测扩增结果，扫描仪记录电泳图谱，根据电泳图谱分析各微卫星位点的扩增情况；

<4>遗传多样性分析：根据个体微卫星扩增产物的分子量大小确定基因型，利用GENEPOP Version 4.0计算遗传多样性参数；

<5>基因分型的结果分析，去除下列备选位点：无基因分型结果的位点；在任一个体中等位基因数在两个以上的位点；在30个管角螺个体中等位基因在两个以下的位点。