[发明专利]一种维生素K2（MK-7）含量的测定方法

权利要求书

1.一种维生素K₂ （MK-7）含量的测定方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）样品溶液的配制：

取3.0-5.0g样品于50ml棕色容量瓶中，加入30ml异丙醇，在45~55℃恒温水浴锅涡旋振荡0.5~1.0小时，冷却至室温下，用异丙醇定容至刻度，摇匀，即为样品溶液；

（2）高效液相色谱实验条件：

色谱柱：JADE-PAK ODS（150×4.6mm，5um）或等效色谱柱；

流速：0.8~1.5ml/min；

检测波长：270nm；

流动相：无水乙醇与乙腈的混合溶液，其中无水乙醇占比50%~60%；

进样量：10μl；

柱温：35~45℃；

洗脱时间：20 min ；

（3）对照品溶液的配制：取维生素K₂（MK-7）对照品【CAS号：2124-57-4】，制成每 1 ml 分别含1.0μg、2.0μg、4.0μg、6.0μg、8.0μg 的对照品溶液；

（4）维生素K₂（MK-7）含量测定：

高效液相色谱测定：不同浓度的对照品溶液分别以10μl 进样，测得各标准品溶液的高效液相色谱峰面积；以所得各标准对照品峰面积为纵坐标，各对应标准对照品浓度为横坐标分别做标准曲线，分别计算得线性回归方程；然后对样品溶液进行高效液相色谱测定，得到维生素K₂（MK-7）色谱峰的峰面积，根据标准曲线计算样品中维生素K₂（MK-7）的含量，并结合样品的质量，经计算得到维生素K₂（MK-7）的含量。

2.如权利要求1所述的维生素K₂ （MK-7）含量的测定方法，其特征在于：所述步骤四中的维生素K₂（MK-7）含量的计算公式为：

 式中   A样：样品溶液的维生素K₂峰面积；

C：对照品溶液的浓度，μg/ml；

A标：对照品溶液的维生素K₂峰面积；

W样：样品称重，g。

3.如权利要求1所述的维生素K₂ （MK-7）含量的测定方法，其特征在于：所述的样品溶液经0.45um微孔滤膜过滤后再进样。

4.如权利要求1所述的维生素K₂ （MK-7）含量的测定方法，其特征在于：所述的步骤一中的样品为固体样品则需先用研钵及研杵研磨成细粉后使用，若样品为液体样品则直接取用，若样品为胶囊样品则取若干胶囊的内容物，研磨混合均匀后使用。

5.如权利要求1所述的维生素K₂ （MK-7）含量的测定方法，其特征在于：所述方法适用于含维生素K₂（MK-7）的片剂、维生素K₂（MK-7）类硬胶囊、维生素K₂（MK-7）类粉剂、维生素K₂（MK-7）类软胶囊、维生素K₂（MK-7）类滴剂、维生素K₂（MK-7）类丸剂、维生素K₂（MK-7）类软糖、维生素K₂（MK-7）类饮料，产品可以是保健食品、药品、普通食品或预混料。