[发明专利]高山卵叶韭快速繁殖方法

权利要求书

1.高山卵叶韭快速繁殖方法，包括以下步骤：

1）取卵叶韭鳞茎盘清洗后，剥除最外一层鳞茎，消毒；

2）剥除卵叶韭鳞茎盘至直径为0.3~0.5 cm，以此鳞茎盘直接按极性方向竖插于配制好的诱导培养基中，诱导培养基的配方为：MS+6-BA 1.5~2.5 mg/L+NAA 0.15~0.25mg/L+琼脂4000~6000 mg/L+白糖 25000~35000 mg/L；

 3）光照培养，温度为18~22 ℃，光强1500~2000 Lx，每天光照10~12 h，培养30~60 d，长出丛芽；

4）将丛芽切割成数个0.4cm~0.6cm小丛芽转入继代增殖培养基中，增殖培养基的配方为：MS+6-BA0.5~1.5 mg/L+NAA 0.15~0.25mg/L+琼脂4000~ 6000 mg/L+白糖 25000~35000 mg/L；以后每隔25~35 d 继代1 次，继代培养过程中将苗高3~5 cm的小苗转生根培养基中，生根培养基的配方为：MS+NAA 0.05~0.15 mg/L +琼脂4000~6000 mg/L+白糖 30000~60000 mg/L；

5）卵叶韭试管苗接种于生根培养基中30~40 d，待长3~5条根时开瓶炼苗5~7 d，将瓶内苗取出，将组培苗移栽到基质进行常规培养。

2.根据权利要求1所述的方法，步骤1）为取4~ 5月上旬卵叶韭植株消苗后，未形成花葶前，健康、饱满鳞茎盘，剥净灰褐色至黑褐色网状鳞茎盘外皮和根，用1 %质量比洗衣粉水浸泡4 ~ 6 min，用自来水冲洗干净；剥除最外一层鳞茎，用1%质量比洗衣粉水浸泡4~6 min，用自来水冲洗干净；在超净工作台上用75 %体积比的酒精溶液浸泡10~30 s，用0.1 %重量比升汞溶液消毒 3~5 min，无菌水冲3~5次。

3.根据权利要求1所述的方法，步骤2）为无菌纸吸干外植体表面水分，用灭菌的手术刀剥除卵叶韭鳞茎盘至直径为0.3~0.5 cm，按极性方向竖插于配制好的诱导培养基中，诱导培养基的配方为：MS+6-BA2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L+琼脂5000 mg/L+白糖 30000 mg/L。

4.根据权利要求1所述的方法，步骤4）中增殖培养基的配方为：MS+6-BA1.0mg/L+NAA 0.2mg/L+琼脂5000 mg/L+白糖30000 mg/L；生根培养基的配方为：MS+NAA 0.1 mg/L +琼脂5000 mg/L+白糖 30000 mg/L。

5.根据权利要求1所述的方法，步骤5）为卵叶韭试管苗接种于生根培养基中30~40 d，待长3~5条根时开瓶炼苗5~7 d，将瓶内苗取出，用0.003 %~0.005 %重量比NAA溶液浸苗根基部10~15 min，将组培苗移栽到基质（草炭/珍珠岩/蛭石=2/1/1，体积比）中，浇足定根水，盖上小拱棚膜保温保湿，前期温度保持在15~20 ℃，湿度80~90 %，7~15 d后揭膜，逐步延长揭膜时间，直至不覆膜，每隔2~3周浇施 0.1 %~0.3 %重量比尿素和0.1 %~0.3 %重量比KH₂PO₄或稀薄粪水，注意进行病虫害防治，组培苗成活率达95 %以上，将成活苗移栽。