[发明专利]一种检测人凝血酶原复合物抗凝能力的方法有效
申请号: | 201410757119.3 | 申请日: | 2014-12-10 |
公开(公告)号: | CN104459165A | 公开(公告)日: | 2015-03-25 |
发明(设计)人: | 曹海军;田倩;辛叶;叶生亮;李长清 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院输血研究所 |
主分类号: | G01N33/86 | 分类号: | G01N33/86;G01N21/78 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 李高峡;张娟 |
地址: | 610052 四川省成都市成*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 凝血酶原 复合物 抗凝 能力 方法 | ||
1.一种检测人凝血酶原复合物抗凝能力的方法,其特征在于:它包括如下步骤:
(1)取人凝血酶原复合物,稀释至凝血因子IX为0.8-1.3IU/ml,加入等体积浓度为4-6IU/ml的人凝血酶溶液,混匀,室温放置1-2min;
(2)再加入与人凝血酶溶液等体积的凝血酶发色底物溶液,混匀,22-28℃条件下孵育4-6min,所述发色底物溶液的浓度为0.5-0.7mg/ml;
(3)在405nm波长条件下测定吸光值,每30s-50s测定1次,共测定5-8次;
(4)以测定的吸光值为纵坐标(y),以时间(s)为横坐标(x),绘制吸光值随时间变化的趋势,并建立线性方程y=kx+a,其中k为斜率,计算1/k的值,即可。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,稀释至凝血因子1-1.2IU/ml。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,人凝血酶溶液的浓度为5IU/ml。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,室温放置的时间为2min。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)中,所述凝血酶发色底物为CS-01(38),其分子式为H-D-Phe-Pip-Arg-pNa·2HCl。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)中,所述孵育的温度是26℃。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)中,所述孵育的时间是6min。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)中,所述发色底物溶液的浓度为0.6mg/ml。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,每40-50s测定1次。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,共测定5-6次。
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