[发明专利]一种功能植物乳杆菌及其复合菌粉的制备

说明书

技术领域

本发明涉及一种具有降胆固醇能力的植物乳杆菌植物亚种，并以植物乳杆菌菌粉为主要原料，添加纳豆粉及红曲粉，制备一种具有降胆固醇功能的复合菌粉，属于功能食品及微生态制剂应用领域。

背景技术

血清胆固醇水平偏高是引发心血管疾病的主要危险因素，本发明所采用的植物乳杆菌植物亚种、纳豆芽孢杆菌、紫红曲霉均为可食用的益生菌，由这三种菌株制成的功能性复合菌粉，能够预防高胆固醇血症，对人体具有很好的保健效果。

益生乳酸菌能够促进蛋白质等营养物质的吸收，产生维生素B族等大量有益物质，改善人体肠道功能，恢复人体肠道内菌群平衡，增强人体免疫力，抗肿瘤，还具有降胆固醇、降血脂、降血压作用；能消除体内自由基，具有抗衰老的作用。

纳豆芽孢杆菌可改变人体肠道菌群生态，帮助正常消化道机能，维持体内生理环境。分泌各种酶和维生素，促进小肠黏膜细胞的增殖。此外，纳豆芽孢杆菌在利用大豆蛋白生长时，产生纳豆激酶和维生素K，具有治疗三高(高血糖，高血压，高血脂)和溶解血栓的作用。

红曲的代谢产物中具有能降低血清胆固醇的天然他汀类物质，特别是含有洛伐他汀(一种具有显著血脂调节能力的活性物质即Monacolin K)，同时还能产生许多对人体有益的成分，如必需氨基酸、不饱合脂肪酸等。大量研究发现，红曲具有非常强大的降低总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、血清甘油三酯、动脉粥样硬化指数，升高高密度脂蛋白胆固醇的显著综合疗效。服用红曲安全性高、副作用小，并能有效的治疗冠心病、脑中风等心脑血管疾病及与高血脂相关的疾病，如糖尿病、肾病综合征及脂肪肝，被认为是当前最有前途的降脂物质。

目前，国内外对功能性植物乳酸菌有很多研究，吉林省农业科学院申请的“一株具有降胆固醇功能的植物乳杆菌及其应用”(CN201010034128.1)公开了一株具有降胆固醇能力的植物乳杆菌菌株。天津科技大学申请的“一种降血脂及调节肠道菌群的益生菌制剂的制备方法”(CN200910069088.1)对Kefir源植物乳杆菌进行发酵、冻干，并介绍了其具有降胆固醇能力和调节肠道菌群的生理功能。此外，还有一些专利文献涉及了降胆固醇能力的植物乳杆菌，但都尚未涉及纳豆和红曲复配，制成功能性菌粉。据此，本发明主要利用一株具有降胆固醇能力及较强的耐酸性、耐胆盐能力的植物乳杆菌植物亚种，与纳豆芽 孢杆菌制备的纳豆菌粉和紫红曲霉制备的红曲粉，制备一种具有降胆固醇功能的复合菌粉。

发明内容

本发明目的是提供一种具有降胆固醇能力的植物乳杆菌植物亚种菌粉，与纳豆芽孢杆菌制备的纳豆粉和紫红曲霉制备的红曲粉复配，制备一种具有降胆固醇功能的复合菌粉。

1、植物乳杆菌植物亚种菌粉的制备方法

本发明涉及的一株植物乳杆菌植物亚种(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum)Zhang-LL，已于2012年12月04日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，其保藏号为：CGMCC No.6936。其特征在于MRS培养基，培养2d，菌体形态：菌体短杆状，0.5×1.33～2.0μm，单个，成对或呈短链状排列，不生芽孢，革兰氏阳性。

植物乳杆菌植物亚种菌粉的制备步骤：

(1)菌种活化：将活化扩大培养后的植物乳杆菌植物亚种Zhang-LL菌种，接种到2L改良MRS培养基中，利用5L全自动发酵罐进行高密度发酵，温度控制在34℃，发酵液pH 6.5，搅拌转速为150r/min，发酵20～28h，得到发酵液。

上述方法中，改良MRS液体培养基配方：胰蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母浸粉5.0g，柠檬酸三铵2.0g，葡萄糖20.0g，吐温80 1.0mL，乙酸钠5.0g，磷酸氢二钾2.0g，硫酸镁0.5g，硫酸锰0.25g，水1L，pH6.5，0.1Mpa灭菌15min。

(2)收集菌泥：将发酵液置于离心机中，于4℃、8000r/min离心10min，收集得到菌泥。

(3)预冻和冷冻干燥：将植物乳杆菌植物亚种菌泥与1/10原发酵液体积的保护剂混合，冻干保护剂成分为15％脱脂乳粉，混合均匀后，得到浓缩发酵剂；将浓缩发酵剂于-35℃冰箱中预冻13h后，得到预冻活菌制剂，利用真空冷冻干燥机将预冻活菌制剂于-55℃、真空度0.08mBar的条件下，冻干48h至完全干燥状态，获得植物乳杆菌植物亚种冻干菌粉(活菌制剂)。

2、纳豆芽孢杆菌纳豆粉的制备方法