[发明专利]一种同时检测生物样品中有机氯农药和多氯联苯的同位素稀释高分辨色质联用方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及环境分析领域，具体涉及一种同时检测生物样品中有机氯农药和多氯联苯的同位素稀释高分辨色质联用方法及应用。

背景技术

多氯联苯和六六六(BHC)、滴滴涕(DDT)等持久性有机氯农药是斯德哥尔摩公约规定的持久性有机污染物，属于各国履约要重点检测的污染物。从国内外来看，目前多氯联苯类和有机氯农药类POPs污染物的检测仍然以气相色谱-电子捕获检测器(GC-ECD)、气相色谱－低分辨质谱(GC-LRMS)等方法作为主流技术,上述方法容易引入干扰从而带来假阳性结果,影响测量结果的准确性。气相色谱－同位素稀释高分辨质谱技术作为准确性更高的“金标准”方法，在上述污染物的定量检测和检测结果的准确性和可靠性方面具有明显的优势。环境样品由于其复杂的基质，在目标物检测时难免会存在各种干扰物。与低分辨质谱法和ECD方法相比，高分辨质谱法具有以下优势:选择性更好(峰形单一，干扰峰少)、定量更准确(减少假阳性结果)、检出限更低(提高100倍以上)、线性范围更宽。一些在低分辨质谱法和ECD方法中由于低于检测限或干扰太多而无法定量的目标物在高分辨质谱法中却可以准确地定量。目前我国还没有有机氯农药检测的高分辨质谱标准方法颁布。美国EPA分别颁布了针对有机氯农药(EPA1699－2007)以及针对多氯联苯(EPA1668B-2008)检测的高分辨质谱分析方法，但是有机氯农药和多氯联苯的前处理和检测方法都属于不同的方法体系，是两个截然不同的方法，EPA颁布的高分辨质谱方法无法对有机氯农药和多氯联苯同时进行样品前处理和同步检测。

发明内容

针对上述问题，本发明提供了一种同时检测生物样品中有机氯农药和多氯联苯的同位素稀释高分辨色质联用方法。具体方法为将样品添加同位素标记的提取内标(即定量内标)后，运用提取技术提取样品中的有机氯农药和多氯联苯类目标物，提取液经先过凝胶渗透色谱(GPC)净化再结合弗罗里硅土柱(或硅胶柱)净化、浓缩的前处理后,添加进样内标(即回收率内标)用高分辨气相色谱－高分辨质谱分析检测，稳定同位素稀释法定量，以实现对两类目标物的同步净化和同步检测。

本方法前处理和检测的有机氯农药可涵盖α-六六六、β-六六六、γ-六六六、δ-六六六、P.P’-DDE、op’-DDE、P.P’-DDT、O.P’-DDT、P.P’-DDD、op′-DDD、六氯苯、七氯、反式氯丹、顺式(cis-)氯丹、氧化氯丹、顺式九氯、反式(trans-)九氯、顺式环氧七氯、反式环氧七氯、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、灭蚁灵等23种农药，检测的多氯联苯涵盖了WHO规定的12种有毒的PCBs即PCB81、PCB77、PCB123、PCB118、PCB114、PCB105、PCB126、PCB167、PCB156、PCB157、PCB169、PCB189,以及6种环境存量较大的指示性PCBs即PCB28、PCB52、PCB101、PCB153、PCB138、PCB118。

检测所用的色谱柱为DB-5ms柱或等效色谱柱，色谱升温程序区间为40℃至350℃。

在质谱分辨率大于6000的条件下，通过精确质量测量监测目标化合物的两个特征离子(m/z)M1和M2，获得目标化合物的特异性响应；定量内标为目标化合物的同位素标记化合物，采用稳定性同位素稀释法准确测定样品中目标化合物的含量。每个目标物选取两个具有精确质量数的特征定量离子M1和M2进行定性，同时每个目标物用其对应的¹³C同位素内标的保留时间(或相对保留时间)进一步定性，目标物特征定量离子(即M1和M2)对应的¹³C同位素内标的特征定量离子为m1和m2。

获得目标物在高分辨质谱图上特征定量离子M1和M2的峰面积之和，以及目标物的¹³C同位素内标的特征定量离子m1和m2的峰面积之和，然后根据目标物和同位素内标的响应特征以同位素稀释法对目标物进行定量。