[发明专利]一种检测内源性H2S的荧光探针及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物化工领域，涉及可用于构建生物体内检测内源性H₂S的新型荧光染料，具体涉及一种检测内源性H₂S的荧光探针及其制备方法和应用。

背景技术

氟化硼络合二吡咯甲川类(Boron-dipyrromethene，简称BODIPY)荧光染料是一类性能优异的新型荧光染料，具有较高的荧光量子产率和摩尔消光系数，并且表现出很好的光稳定性；染料分子在一定的条件下容易得到或者失去电子，可以用于设计基于电子转移原理的荧光探针，还可以经适当修饰应用在荧光标记和DNA测序中。BODIPY染料由硼桥键和甲川键把两个吡咯环固定在一个平面上，使分子具有刚性共平面结构，在激发光的作用下能产生强烈的荧光。BODIPY类荧光染料分子的高度刚性使其具有高的摩尔消光系数，还具有高荧光离子产率、良好的光稳定性、激发波长在可见光区、结构易修饰、发射波长可调至近红外、不易受环境、溶液pH的影响等优点。目前合成此类染料的研究工作仍存在不足，如水溶性差、检测范围比较局限大部分用于检测外源性的小分子等。

发明内容

本发明的第一个目的提供一种检测内源性H₂S的荧光探针。

本发明第二个目的是提供一种检测内源性H₂S的荧光探针的制备方法。

本发明第三个目的是提供一种检测内源性H₂S的荧光探针在检测内源性H₂S上的应用。

本发明第四个目的是提供一种用于检测内源性H₂S的化合物。

本发明第五个目的是提供一种用于检测内源性H₂S的化合物的制备方法。

本发明第六个目的是提供一种用于检测内源性H₂S的化合物在检测内源性H₂S上的应用。

本发明的技术方案如下：

一种检测内源性H₂S的荧光探针，其特征在于，所述荧光探针由化合物BODInD和氟硼二吡咯甲川在两性表面活性剂中经自组装而制得；

所述化合物BODInD为：

其中：R₁，R₂，R₃为烷基取代基，R₄为烷基取代基、端基炔或酯取代基。

所述氟硼二吡咯甲川为下式9所示的结构式：

根据本发明所述检测内源性H₂S的荧光探针，所述荧光探针为纳米球，所述纳米球的外围为两性表面活性剂，内部为化合物BODInD和氟硼二吡咯甲川。

根据本发明所述检测内源性H₂S的荧光探针，所述纳米球的粒径为10-20nm。

根据本发明所述检测内源性H₂S的荧光探针，优选的是，所述两性表面活性剂选自DSPE-PEG(二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇)和DSPE-PEG-NH₂(二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-氨基)中的一种。

根据本发明所述检测内源性H₂S的荧光探针，优选的是，所述烷基取代基为甲基、乙基或正丙基。

根据本发明所述检测内源性H₂S的荧光探针，优选的是，所述端基炔为乙炔或正丙炔。

根据本发明所述检测内源性H₂S的荧光探针，优选的是，所述酯取代基为乙酸甲酯或乙酸乙酯。

本发明还提供一种所述检测内源性H₂S的荧光探针的制备方法，包括如下步骤：

(1)以酰基乙酸乙酯为原料经成环、水解、脱羧、还原得到烷基吡咯；

(2)以苯甲酰氯为原料经酰化、缩合、叉硼反应得到苯甲酰吡咯氯；

(3)所述的烷基吡咯与苯甲酰吡咯氯反应生成取代的BODIPY；

(4)所述取代的BODIPY经过醛基化反应，再与吲哚盐缩合得到化合物BODInD；

(5)所述化合物BODInD与氟硼二吡咯甲川在两性表面活性剂的水溶液中形成所述的荧光探针。

所述检测内源性H₂S的荧光探针的制备方法，所述两性表面活性剂选自DSPE-PEG和DSPE-PEG-NH₂中的一种。

所述检测内源性H₂S的荧光探针的制备方法的合成路线如下：