[发明专利]一种无菌分离北虫草菌种的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种食用菌菌种分离方法，属于食用菌生产技术领域。

背景技术

北虫草，也叫北冬虫夏草、蛹虫草，是我国常见虫草菌之一，为子囊菌亚门、核菌纲、球壳目、麦角菌科、虫草属，其宿主主要为鳞翅目的天蚕蛾科、舟蛾科、蚕蛾科等，主要分布在我国东北、华北和西北等地区。成熟的北虫草子实体5-15公分，金黄或桔黄色，是一种名贵的药用真菌，与冬虫夏草有相似的药用和滋补功效。北虫草特有的虫草素、虫草酸、虫草多糖以及丰富的蛋白质、氨基酸和30多种人体所需的微量元素，具有重要的营养价值。国内外研究表明，北虫草使用和药用价值可以传统的冬虫夏草媲美，人工培养的北虫草虫草素和虫草酸等含量高于野生冬虫夏草几十倍。虫草素、虫草酸具有滋肺补肾、止血化痰、扩张气管、降血压等功效。卫生部已经品准蛹虫草为新食品原料，人工栽培的北虫草弥补了野生虫草数量少，品质参差不齐的缺点，已成为虫草市场的新品种，具有广阔的发展前景。

但是优良的菌种成为限制北虫草人工培养产业的限制因子，由于菌种极易退化，保存时间较短，使得普通种植户必须从专业的菌种培育机构购买菌种，增加了投入。连续使用，会出现不出草、出草率低、品质下降等问题，给种植户造成经济损失。食用菌菌种一般采用组织分离或孢子分离方法获得菌种，北虫草组织分离的方法一般都选用长度在2cm以上的子实体顶端部位进行分离，在子实体培养的过程中，处在相对无菌的培养间，所以分离菌种前须进行消毒处理，分离后还需进行菌种的纯化，操作难度大，要求操作人员受过专业训练。采用成熟子实体进行菌种分离，培养时间长。本专利采用的组织分离方法简单易操作，可操作性强，选取无菌条件下培养的幼嫩子实体，不需要进行子实体的消毒和纯化即可得到纯的菌种，大大缩短了菌种分离的周期且分离得到的菌种出草率高。

发明内容

本发明公开一种北虫草菌种分离的方法，包括培养基的制作、子实体的选择和处理、取种部位，其特征在于，选取无菌培养的长度0.5cm-2cm的幼嫩子实体，取种部位可以在子实体任何部位，不需要进行子实体的消毒和纯化处理，菌丝生长活力较强，有利于分离的菌种保持较高的活性，而且子实体培养时间短，可以缩短育种周期，加快生产效率。

本发明的技术方案实现过程：

1、制作培养基：培养基制作方法是先将100g去皮土豆用800ml蒸馏水煮15min，用4层纱布过滤取其汁，然后加入18g琼脂粉、蛋白胨10g，葡萄糖15g，磷酸二氢钾1g，结晶硫酸镁1g，维生素B₁15mg，调节PH至6.5，定容至1000ml，分别装入试管中，121℃，30min高压灭菌后，试管摆斜面，制成斜面培养基。

2、挑选种草：选择色泽金黄、粗细均匀、长势整齐，无破损、病虫害感染、0.5-2cm的北虫草子实体作为种草。

3、子实体的处理：在超净工作台中，将无菌培养的北虫草直接取下，然后用无菌手术刀将子实体的任何部位切下，用无菌接种针接种至试管斜面中，用棉塞封口后，20-25℃培养5-7。

本发明方法简单、易操作，本发明有以下优点：

1、分离过程简单，周期短，易操作，实用性强。

2、选取长度在0.5cm-2cm之间的子实体都可以满足菌种分离的要求，分离得到的菌种活力强，并且培养时间短，可以缩短育种周期，加快生产速度。

3、挑选种草，要选择色泽金黄、粗细均匀、长势整齐，无破损、病虫害的子实体。

4、子实体生长在无菌的条件下，不需要进行消毒处理，降低了对消毒剂对子实体的伤害，保证了分离到的菌种具有较强的活力。

5、选择取种部位，由于幼嫩子实体正处于其生长旺盛时期，分离获得菌种活力较强。用接种针挑取子实体任何部位，不需要对分离的菌种进行纯化即可得到纯的菌种，污染率极低。