[发明专利]一种玉米内生枯草芽孢杆菌及其生防应用

说明书

技术领域

本发明属于玉米病害防治技术领域，尤其涉及一种玉米内生枯草芽孢杆菌及其生防应用。

背景技术

玉米是我国主要的粮食作物之一，种植面积和总产量仅次于小麦和水稻，居第三位。近年来，玉米除供食用外，还用作发展畜牧业的优质饲料和轻工业、医药工业的重要原料，因此玉米在国民经济的发展中处于重要地位。

近年来，随着气候的变迁，栽培制度的变革和品种的更换以及高淀粉品种的大面积种植，玉米的土传病害，尤其是纹枯病有逐年加重的趋势。一般年份发病率大约在10％-30％，严重年份甚至可以达到60％以上，致使玉米产量显著降低，所以土传病害已成为玉米稳产、高产的主要制约因素之一。土传病害的综合防治方法主要有种子处理、清除病残体、选育抗病品种及轮作等措施。但由于土传病害很难获得抗性材料，所以种子处理显得尤为重要。在玉米叶斑病防治方面，除了应用抗性品种、保健栽培和化学防治之外，仍缺少更为有效的防治技术，尤其是生物防治技术。因此，生物农药以其安全、无残毒、对人畜无害和对环境无污染等特点备受国内外科学家的关注。而内生细菌以其存在于植物体内，生存环境稳定，不易受到外界环境的影响等优势，在生物防治植物病害方面比叶际、根际的细菌具有更大潜力。

目前国内外的玉米生物防治研究基本上只针对单种病害，且防效不稳定，所以，本领域技术人员迫切需要能够有效防治玉米相关病害的多功能微生物新制剂的出现。

发明内容

为克服上述现有技术中存在的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种玉米内生枯草芽孢杆菌。所述的玉米内生枯草芽孢杆菌能够有效防治玉米纹枯病和诱抗玉米小斑病。

本发明的另一目的在于提供上述玉米内生枯草芽孢杆菌的生防应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种玉米内生枯草芽孢杆菌，该菌株为Bacillus subtilis BS0521，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏起始日期为2014年11月16日，保藏号为CCTCC NO：M 2014566，保藏地址：中国武汉武汉大学。

本发明玉米内生枯草芽孢杆菌对健康玉米苗具有促生作用，同时能增加根系活力，可作为玉米苗期的生物肥料应用。

上述的玉米内生枯草芽孢杆菌在防治玉米纹枯病和诱抗玉米小斑病中的应用。可作为生物型种衣剂有效防治纹枯病，同时可作为玉米小斑病的诱抗剂。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

本发明公开了一种防治玉米纹枯病和诱抗玉米小斑病的枯草芽孢杆菌菌株，经鉴定命名为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS0521，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2014566。本发明菌株对健康玉米苗具有促生作用，同时能增加根系活力，可作为玉米苗期的生物肥料；在离体条件下对玉米多种病害的病原菌能产生抑制作用，可作为生物型种衣剂有效防治纹枯病，同时可作为玉米小斑病的诱抗剂。

附图说明

图1为菌株BS0521对玉米小斑病病原菌的拮抗活性结果图；其中：A为仅接种病原菌的对照组，B为接种BS0521后的处理组。

图2为BS0521诱导后PAL、POD和PPO活性结果图；其中：A为BS0521诱导后PAL的活性结果图，B为BS0521诱导后POD的活性结果图，C为BS0521诱导后PPO的活性结果图。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

如未特殊说明，实施例中的操作方法均为常规方法。

实施例1：枯草芽孢杆菌BS0521的分离及鉴定

本发明菌株枯草芽孢杆菌BS0521分离自甜玉米种子，具体操作方式如下：

(1)样品处理：准备浙凤甜2号玉米种子，经清水冲洗后，用30℃无菌水浸泡30min；

(2)表面灭菌：经无菌水冲洗后置于95％的酒精3min，消毒结束后立即用无菌水漂洗4次，同时取最后一次漂洗水120μL涂布于NA培养基(牛肉浸膏1g，蛋白胨5g，酵母膏5g，氯化钠5g，蔗糖10g，琼脂20g，水1000mL)，28℃培养72h，检测表面灭菌效果；

(3)分离：用灭菌剪刀将表面无菌材料剪成小块后，转入盛有1mL无菌水的离心管中，充分震荡，吸取菌悬液0.2mL涂布于NA培养基上，重复3次，28℃培养2-3d；

(4)纯化：挑取培养特征相异的单个菌落，经培养纯化后作为供试菌株。