[发明专利]白菜型油菜花粉的离体萌发培养测定花粉活力的方法有效
申请号: | 201410781780.8 | 申请日: | 2014-12-16 |
公开(公告)号: | CN104480184A | 公开(公告)日: | 2015-04-01 |
发明(设计)人: | 刘自刚;张树娟;孙万仓;李学才;方彦;武军艳;杨刚;王月;王凯音;刘林波;侯献飞;马骊;钱武;杨建胜;刘海卿 | 申请(专利权)人: | 甘肃农业大学 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02 |
代理公司: | 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 | 代理人: | 张真 |
地址: | 730070 *** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 白菜 油菜 花粉 萌发 培养 测定 活力 方法 | ||
1.一种白菜型油菜花粉的离体萌发培养测定花粉活力的方法,其特征在于包括以下步骤:
1)花粉采集:
选取发育正常、无病虫危害的健壮白菜型油菜植株,于白菜型油菜盛花期选取已开花的花序,收集花粉;
2)花粉离体萌发及花粉管生长:
将花粉均匀播种在白菜型油菜花粉离体萌发液体培养基上,30℃~40℃恒温培养;pH为6.0~7.0;
花粉离体萌发培养15min~25min后部分花粉开始萌发,花粉萌发后花粉管长度超过花粉粒直径,花粉管开始快速生长;
3)花粉活力的测定:
离体培养45min~1h后,以花粉管长度大于花粉粒直径为花粉萌发标准,每处理重复3次,每重复随机观察3~5个视野,每视野观察花粉数30~80粒,统计花粉萌发率,花粉萌发率反应有生活力花粉所占比例。
2.如权利要求1所述的白菜型油菜花粉的离体萌发培养测定花粉活力的方法,其特征在于步骤还包括有:
4)用LeicaDM6000B全自动正置显微镜系统自带测微尺测量花粉管长度,每视野随机测量10~15个花粉,每处理共测30~40个花粉管长度,计算其平均值,花粉离体萌发花粉管生长情况反应花粉粒生理状况的优劣。
3.如权利要求1所述的白菜型油菜花粉的离体萌发培养测定花粉活力的方法,其特征在于所述的白菜型油菜花粉离体萌发液体培养基,以BK为溶剂,其包含的组分有50g·L-1~100g·L-1的PEG 6000(聚乙二醇6000)、130g·L-1~150g·L-1的蔗糖、1.5mg·L-1~2.5mg·L-1的赤霉素和8.5m g·L-1~10mg·L-1的维生素B1,pH为6.0~7.0。
4.如权利要求3所述的白菜型油菜花粉的离体萌发培养测定花粉活力的方法,其特征在于所述的BK的组成为:H3BO3100mg·L-1、Ca(NO3)2·4H2O 300mg·L-1、MgSO4·7H2O 200mg·L-1和KNO3100mg·L-1。以蒸馏水为溶剂。
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