[发明专利]microRNAs在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用

权利要求书

1.hsa-miR-4286或hsa-miR-449c作为Brachyury阳性肿瘤的分子标记物的应用。

2.microRNAs在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述的microRNAs选自hsa-miR-4286、hsa-miR-449c中的任一或两者的组合。

3.根据权利要求2所述的microRNAs在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述的Brachyury阳性肿瘤是指该肿瘤中Brachyury呈现出高水平的表达。

4.根据权利要求2所述的microRNAs在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述的Brachyury阳性肿瘤是指肺癌、小肠癌、胃癌、肾癌、膀胱癌、子宫癌、卵巢癌、睾丸癌、脑癌、淋巴癌、结肠癌，或前列腺癌。

5.根据权利要求2至4任一所述的microRNAs在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述的试剂是指检测所述的microRNAs表达量的寡聚核苷酸；所述的试剂盒是指包含检测所述的microRNAs表达量的寡聚核苷酸。

6.根据权利要求5所述的microRNAs在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，检测所述的microRNAs表达量的寡聚核苷酸包括反转录引物、PCR上游引物，或PCR下游引物。

7.根据权利要求5所述的microRNAs在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，检测所述的microRNAs表达量的寡聚核苷酸序列包含如下A组、B组，或AB两组的组合：

A组：反转录引物如SEQ ID NO:3所示；PCR上游引物如SEQ ID NO:4所示；PCR下游引物如SEQ ID NO:5所示；

B组：反转录引物如SEQ ID NO:6所示；PCR上游引物如SEQ ID NO:7所示；PCR下游引物如SEQ ID NO:5所示。

8.根据权利要求6或7所述的microRNAs在制备早期筛查或诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，本发明的试剂盒包括以下组分：

A.反转录引物，1管10uM浓度，100uL；

B.PCR上游引物，1管10uM浓度，100uL/管；

C.PCR下游引物，1管10uM浓度，100uL/管；

D.正常标准品，1管，10uM浓度，100uL。

9.检测hsa-miR-4286或hsa-miR-449c表达量的寡聚核苷酸序列在制备诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述的寡聚核苷酸序列包含如下A组、B组，或AB两组的组合：

A组：反转录引物如SEQ ID NO:3所示；PCR上游引物如SEQ ID NO:4所示；PCR下游引物如SEQ ID NO:5所示；

B组：反转录引物如SEQ ID NO:6所示；PCR上游引物如SEQ ID NO:7所示；PCR下游引物如SEQ ID NO:5所示。

10.根据权利要求9所述的检测hsa-miR-4286或hsa-miR-449c表达量的寡聚核苷酸序列在制备诊断Brachyury阳性肿瘤试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，利用所述的寡聚核苷酸检测hsa-miR-4286或hsa-miR-449c表达量的方法包括如下步骤：

取样本中的总RNA，加入反转录引物、5×PrimeScript Buffer、PrimeScript RT Enzyme Mix I、RNase Free dH2O反转录成cDNA，应用EASY Dilution稀释试剂盒中的正常标准品，以所反转录的cDNA为模板向反应体系中加入PCR上游引物、PCR下游引物，通过反转录联合聚合酶链式反应检测hsa-miR-4286或hsa-miR-449c的表达量。