[发明专利]一种微生物冻干保护剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种微生物冻干保护剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

(1)将肠膜明串珠菌(L.mesenteroides)菌种接种于番茄汁蔗糖培养基中，所述番茄汁蔗糖培养基的pH值为6.5-7.5，蔗糖的质量百分比浓度为5-20％，其余为番茄汁，20-35℃，100-300rpm振荡培养24-72小时，获得发酵液；

(2)将步骤(1)所得发酵液稀释到原体积的2-10倍，调节该发酵液稀释液的pH至6.5-7.5，灭菌，冷却即得。

2.如权利要求1所述的微生物冻干保护剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述菌种为肠膜明串珠菌(L.mesenteroides)BD1710，所述菌种的接种量为0.5-5％，所述百分比为体积百分比。

3.如权利要求1所述的微生物冻干保护剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述番茄汁蔗糖培养基由包括以下步骤的方法制备而得：清洗成熟番茄，去皮榨汁，将所得榨汁过滤后煮沸，离心取上清，加入蔗糖加热溶解后冷却，调节pH值，灭菌后冷却即得。

4.如权利要求2所述的微生物冻干保护剂的制备方法，其特征在于，所述过滤的方法为利用100目纱布过滤取汁，所述煮沸的时间为1-10分钟，所述离心的速度为4,000-12,000g，离心的时间为8-12分钟，蔗糖的加入量为5-20％，所述灭菌的温度为110-135℃，灭菌时间为10-30分钟，调节pH值到6.5-7.5。

5.如权利要求1所述的微生物冻干保护剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述培养的温度为28℃，震荡的速度为180rpm，培养的时间为48小时。

6.如权利要求1所述的微生物冻干保护剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述节pH值为7.0，所述发酵液稀释到原体积的2倍。

7.一种如权利要求1-8任一项所述的微生物冻干保护剂的制备方法制得的微生物冻干保护剂。

8.一种微生物冻干制剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

(1)将植物乳杆菌(L.plantarum)以接种量0.5-5％接种于培养基，35-40℃培养6-12小时获得发酵液，将其6,000-10,000g离心8-12分钟，获得菌体沉淀，所述百分比为体积百分比；

(2)将权利要求7所述微生物冻干保护剂与步骤(1)所得菌体沉淀按照体积比为1:1-1:9混匀，重悬，冷冻干燥后即得。

9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的植物乳杆菌是植物乳杆菌(L.plantarum)ST-Ⅲ，植物乳杆菌ATCC14917，植物乳杆菌WCFS1或植物乳杆菌P8。

10.一种由权利要求8或9所述的制备方法制备而得的微生物冻干制剂。